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细胞凝集反应
更新时【shí】间:2024-9-22   点击次数:1199次

我司技术人员总结出的细胞凝集反应原理和步骤:

实验原理

     细胞质膜是由蛋白质【zhì】不同程度镶嵌在脂【zhī】双层中所【suǒ】形成的动【dòng】态流动结【jié】构,蛋白质和脂类【lèi】分【fèn】子又与寡【guǎ】糖链结【jié】合为糖蛋【dàn】白和糖脂分子,糖【táng】蛋白和糖脂分子【zǐ】伸至细【xì】胞表面【miàn】的【de】分枝状【zhuàng】寡糖链在质膜【mó】表面形成细胞外【wài】被(又称为糖萼)。许多【duō】研究结果表明:细胞间的【de】分子识别【bié】、细胞的【de】生【shēng】长和分化、免疫反应和肿【zhǒng】瘤【liú】发生等均与细胞外被(分枝状【zhuàng】寡糖链)有关。

      凝【níng】集素(lectin)是一类含【hán】糖的(少数凝集素【sù】例外)并能与糖进行专一性结合的蛋白【bái】质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的【de】作用。凝集【jí】素促使细胞凝集主【zhǔ】要是由【yóu】于它【tā】能与【yǔ】细胞外被的糖分子相连【lián】接【jiē】、在细【xì】胞【bāo】间形成【chéng】“桥”的结果,加入与【yǔ】凝集【jí】素互补【bǔ】的糖分子可以抑制细【xì】胞【bāo】间的凝集反应。
实验试剂

1. PBS缓冲液【yè】:称取NaCl 7.2g、Na2HP04 1.48g、KH2P04 0.43g、加蒸【zhēng】馏水【shuǐ】,定容至l000 mL中【zhōng】,调pH值到7.2。
2. 1%肝【gān】素溶液【yè】:称取肝素钠0.1g,定容至l0 mL生理【lǐ】盐水【shuǐ】中即可。
实验设备

 显【xiǎn】微镜、托盘天平【píng】、载玻片若干、5mL注【zhù】射器、滴管2支【zhī】、离心管2支【zhī】。
实验材料

 1. 土豆块茎。
 2. 2% 红细胞悬液 
        以无菌方法抽【chōu】取兔子耳缘静脉【mò】血液(5mL注射器用1%肝素溶【róng】液浸润)1mL,用生理盐水洗5次,每次【cì】3000 r/min,离【lí】心5 min,后【hòu】按沉淀压积的红细【xì】胞体【tǐ】积用生【shēng】理盐水配【pèi】成2%红【hóng】细胞悬液。
实验步骤

1. 称取土豆去皮块茎2g,切成小块
2. 加10 mL PBS缓【huǎn】冲【chōng】液,浸泡2h(浸出的粗提液中含有【yǒu】可溶性土豆凝集素)
3. 载玻片上滴一滴土豆凝集素 
4. 再滴一滴2%红细胞液,充分混匀 
5. 静置20 min 
6. 低倍显微镜下观察血球凝集现象 
7. 以PBS液加【jiā】2%血细胞悬液作【zuò】为对照实验,低倍【bèi】显微镜【jìng】下【xià】观察。

希望细胞凝集反应原理和步骤对大家有所帮助。

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