ELISA试剂盒试验固相载【zǎi】体的选择【zé】：很多物【wù】质可作【zuò】为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙【bǐng】酰【xiān】胺和【hé】纤维素等。

包【bāo】被抗体【tǐ】（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附【fù】在固相载体表【biǎo】面时，恳【kěn】求纯度要好【hǎo】,吸附时通常恳【kěn】求PH在9.0～9.6之间【jiān】。
吸附温度，时间及【jí】其蛋白【bái】量也【yě】有一定影【yǐng】响,通常【cháng】多选用4℃ 18～24小时。
有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应留心防护。
其方法可所以凹孔平板、试管、珠粒等。
如今常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。
不管何种载【zǎi】体，在运用前均可进行选择：用等量【liàng】抗原包被，在同【tóng】一试【shì】验条件下进行反应，查询【xún】其显色反应【yīng】是【shì】不是【shì】均一性，据此判【pàn】明【míng】其吸附功能是不是【shì】出色。
正式试验时，应【yīng】分【fèn】别以【yǐ】阳性对照与阴【yīn】性对照【zhào】控制试验【yàn】条件，待检样【yàng】品应作一式二份，以保【bǎo】证【zhèng】试验作用的性。

ELISA试剂盒试验条件的选择
在ELISA中，进行各项试验条件的选择是很首要的，其间包括:
有【yǒu】条件者应【yīng】运用不【bú】致癌、灵敏度【dù】高的【de】供氢体，如TMB和ABTS是如【rú】今较【jiào】为满意的供氢体。
底物作用一段时间后，应参与强酸或强碱以中止反应。
通常底物作用时间，以9-22分钟为宜。
底物运用液有必要新鲜，尤其是H2O2在临用前参与。
然【rán】后【hòu】再固定其它条【tiáo】件或采【cǎi】纳【nà】“方阵【zhèn】法【fǎ】”（包被物、待检样品的【de】参看品及酶符号抗体分别为不一样的稀【xī】释度）在正式试验系统里地【dì】滴定【dìng】其工作浓【nóng】度。
有时本底较高【gāo】，说【shuō】明有非特异【yì】性反【fǎn】应，可选【xuǎn】用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
酶的底【dǐ】物及供【gòng】氢体的【de】选择：对供【gòng】氢体的选【xuǎn】择恳求是价廉、安全【quán】、有明显地显色【sè】反应，而本身无【wú】色。
蛋白质包【bāo】被的适浓度需进行滴定：即【jí】用不【bú】一样【yàng】的蛋白质【zhì】浓【nóng】度（0.1、1.0和10μg/ml等）进【jìn】行包被后，在其它试验条件相一起，查询阳性标【biāo】本的OD值【zhí】。
选择【zé】OD值【zhí】大而蛋白量少【shǎo】的浓【nóng】度。关于【yú】多数蛋白质来说【shuō】通常为1～10μg/ml。

ELISA试剂盒【hé】试验酶符号抗体工【gōng】作浓度的选择：首先用直接【jiē】ELISA法进行【háng】开始效价的【de】滴定（见【jiàn】酶符号【hào】抗体部份【fèn】）。