在【zài】ELISA实验【yàn】中我们经常【cháng】会碰到试剂盒【hé】变质的问题，是什【shí】么原因导致【zhì】了ELISA试剂盒的变质呢？接【jiē】下来【lái】我就和大家说一说导【dǎo】致ELISA试剂【jì】盒变质的【de】原因有【yǒu】哪些。

导致ELISA试剂盒变质的原因主要分为七种：

1、方法学的影响

ELISA测定模【mó】式【shì】包【bāo】括以下几种：双抗体夹心法、间【jiān】接【jiē】法、双抗原夹心法、IgM抗体【tǐ】捕捉法、竞【jìng】争抑制【zhì】法，其中竞争抑制法(HBeAb,HBcAb等采【cǎi】用)因受操作时差所【suǒ】引起的bu公平竞争等因素【sù】的【de】影响，结果重复性较差，质量较难控制【zhì】。

2、试剂因素

不同批次的ELISA试【shì】剂在制作过程中【zhōng】很难保证质量一致【zhì】，即使是通过批检的项【xiàng】目其检测结果也会存在差异，因此【cǐ】必须选择和订【dìng】购长【zhǎng】批号【hào】的试剂，并保证保存【cún】条件。 严格执行这【zhè】一标准可以避免【miǎn】因试【shì】剂批号改变【biàn】而重【chóng】新建立【lì】质控【kòng】体系及重新评估试【shì】剂的复【fù】杂【zá】过程，并且能够保证结【jié】果的稳【wěn】定性；对于效期短、使用【yòng】率低的【de】试剂，应当小量分装，每【měi】次使【shǐ】用则【zé】取分装部分【fèn】即可，避免反复【fù】冻融【róng】造成试剂的失效【xiào】。

3、样本因素

标本【běn】干扰【rǎo】因素包【bāo】括内源性干扰因素和外源性干扰【rǎo】因【yīn】素，前者包【bāo】括类风湿【shī】因子、补体、异嗜性抗【kàng】体【tǐ】、自身抗【kàng】体、等，后者包括标本【běn】溶【róng】血、标本被【bèi】细菌污染、标本贮【zhù】存时间过长、标本凝固不全、冷冻标本的【de】反复冻【dòng】融等。

4、操作因素

 ELISA操作步【bù】骤【zhòu】复杂，操作不当将引起较大的误差【chà】。加样、温育、洗涤、显色、比色【sè】。

5、标本复查

ELISA手【shǒu】工检测过程复杂，影响因素较多，即使室【shì】内质控在控，也可【kě】能【néng】因孔间差【chà】异【yì】而【ér】造【zào】成结果【guǒ】的差异，因此加大【dà】复查力度是保证结果准【zhǔn】确性的可靠方法。

6、表示结果的常用方法

①定性测定。

②半定量测定，结果一般以滴度表示。

③定量测定，即【jí】用已知【zhī】量的标准【zhǔn】品作【zuò】一系列稀【xī】释后进行【háng】ELISA测定，绘制标【biāo】准曲线，结果以量或单位表示。在ELISA定量检测中每一块反【fǎn】应板都【dōu】必须绘制相应的【de】标准【zhǔn】曲【qǔ】线。