产品时间:2024-9-23
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产品名称:大鼠肿瘤坏死因子-a ELISA检测试剂盒
品 牌:酶联生物
规 格:96T/48T
分 类:大鼠ELISA检测试剂盒
价 格:询价
特 点:灵敏性高【gāo】、特异性强【qiáng】、重【chóng】复性好
运输方面:现货供应
保存温度:低温保存
实验前注意:
1、保证充分的孵育时间和温度。
2、切勿使用不同生产批号的试剂取代现有试剂或混合现有试剂。
3、在混合或溶解蛋白溶液时,避免泡沫产生。
4、在实验开始之前,安排好实验流程。
5、在实验开始之前,清洁工作台。
6、检【jiǎn】查不稳定【dìng】或者变质的试剂溶液【yè】(比【bǐ】如沉淀或【huò】变色),有些试剂,比如标准品稀释【shì】液或【huò】者检 测稀释液,可能在设计时【shí】就含有沉淀物。
7、所【suǒ】有试剂在滴【dī】入酶标板之前【qián】,必需充【chōng】分混匀,而由 于沉淀物的特性,在加入酶【méi】标板之前【qián】,必需不停【tíng】搅【jiǎo】拌。
操作详情:
1、使用前,将所有【yǒu】试剂充分混匀【yún】,不【bú】要使液体产生大量的泡【pào】沫【mò】,以【yǐ】免加样时加入【rù】大量的气泡,产【chǎn】生加【jiā】样上的误差。
2、根据待测样品【pǐn】数量加上标【biāo】准品的数量决定所需【xū】的板条数【shù】,每个标准品和空白【bái】孔建议【yì】做【zuò】复【fù】孔【kǒng】,每个样品根据自己【jǐ】的数量来定【dìng】,能使用复孔的【de】尽量【liàng】做复孔。
3、加入【rù】稀【xī】释好【hǎo】后的标准品50ul于反应孔、加入待测【cè】样品50ul于反【fǎn】应孔内,立即加入50ul的生物-素标记的抗体,盖上膜板,轻轻【qīng】振荡混匀【yún】,37℃温【wēn】育45分钟。
4、甩去孔【kǒng】内液【yè】体,每孔加满【mǎn】洗【xǐ】涤液,振荡30秒【miǎo】,甩去洗涤【dí】液,用吸水纸拍干,重复此操作4次【cì】,如果用洗【xǐ】板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5、每孔【kǒng】加入100ul的亲和【hé】链酶素-HRP,轻轻振荡【dàng】混匀,37℃温育【yù】30分钟。
6、甩去孔内液体,每【měi】孔加【jiā】满洗涤【dí】液,振荡30秒,甩去洗涤液,用【yòng】吸水【shuǐ】纸拍干,重【chóng】复此操作4次,如果用【yòng】洗板机【jī】洗涤,洗涤次【cì】数增加一次。
7、每孔【kǒng】加【jiā】入底物A、B各50ul,轻【qīng】轻振荡混匀,37℃温育5分钟,避免光照。
8、取出酶标板,迅【xùn】速加入50ul终止【zhǐ】液,加入【rù】终止液后【hòu】应立即测定结果。
9.在933nm波长处测定各孔的OD值。
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