产品时间:2024-9-19
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产品名称:猪肿瘤坏死因子-α ELISA检测试剂盒
品 牌:酶联生物
规 格:96T/48T
分 类:猪ELISA检测试剂盒
价 格:询价
特 点:灵敏【mǐn】性高、特异【yì】性强、重【chóng】复性【xìng】好
运输方面:现货供应
保存温度:低温保存
实验前注意:
1、保证充分的孵育时间和温度。
2、切勿使用不同生产批号的试剂取代现有试剂或混合现有试剂。
3、在混合或溶解蛋白溶液时,避免泡沫产生。
4、在实验开始之前,安排好实验流程。
5、在实验开始之前,清洁工作台。
6、检【jiǎn】查不稳定【dìng】或者变质的试剂溶【róng】液(比如沉淀或变色),有些【xiē】试剂,比【bǐ】如标准品稀释液或者检 测稀释液,可【kě】能【néng】在设【shè】计【jì】时就【jiù】含有沉淀物。
7、所有试剂在滴入酶【méi】标板之【zhī】前,必需充【chōng】分【fèn】混匀,而由 于沉淀【diàn】物的特性,在加入酶标板之前,必需不停【tíng】搅拌。
操作详情:
1、使用【yòng】前,将所有试剂充分混匀,不【bú】要【yào】使【shǐ】液体【tǐ】产【chǎn】生大【dà】量的泡沫,以【yǐ】免加样时加入大【dà】量的气泡,产生加样上【shàng】的误差。
2、根据待测样【yàng】品数量加上标【biāo】准品的数【shù】量决定所【suǒ】需的【de】板条【tiáo】数,每个标准品【pǐn】和空白【bái】孔【kǒng】建议做复孔,每个【gè】样品根据自【zì】己的数量来定,能使用复孔的【de】尽量做复孔。
3、加入稀释【shì】好后的标准品50ul于反【fǎn】应孔、加【jiā】入【rù】待【dài】测样【yàng】品50ul于【yú】反应孔内,立即【jí】加入50ul的生物-素标记的抗体,盖【gài】上膜板【bǎn】,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。
4、甩去孔内液体【tǐ】,每【měi】孔加满【mǎn】洗涤液,振【zhèn】荡30秒,甩去【qù】洗涤液,用【yòng】吸水纸拍干,重复此操作4次,如果用【yòng】洗板机【jī】洗涤,洗涤次数增加【jiā】一【yī】次。
5、每孔加【jiā】入100ul的【de】亲和链【liàn】酶素-HRP,轻【qīng】轻振荡【dàng】混匀,37℃温育30分钟。
6、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩【shuǎi】去洗【xǐ】涤液,用吸【xī】水纸拍干【gàn】,重复此操作4次,如果用【yòng】洗板机洗涤,洗涤【dí】次数增【zēng】加一次。
7、每孔【kǒng】加入【rù】底物A、B各50ul,轻【qīng】轻【qīng】振荡混匀,37℃温育【yù】5分钟,避免光照。
8、取出【chū】酶标板,迅速【sù】加【jiā】入【rù】50ul终【zhōng】止液【yè】,加入终止液后应立即测定结果。
9.在933nm波长处测定各孔的OD值。
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