大鼠Irisin ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品名称：大鼠Irisin ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：96T/48T

库存状态：现货供应

产品保存：低温避光保存

适用范围：仅供使用

运输方式：快递

检测目的：用于测定血清、血浆及相关液体等样本

注意事项

1. 严格按照规定的时【shí】间和【hé】温度进行温育以【yǐ】保证准确结果，使用后立即【jí】冷藏【cáng】保存试【shì】剂。

2. 洗板【bǎn】不正确可【kě】以导致不准【zhǔn】确的结果，在加【jiā】入底物前确保尽【jìn】量吸干【gàn】孔内【nèi】液体。

3. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

4. 底物【wù】显色液应呈无色或很浅【qiǎn】的颜色，已【yǐ】经【jīng】变蓝的底物液不能使用。

5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6. 在储存和【hé】温育【yù】时避【bì】免强光直接照射，温育【yù】过程中【zhōng】不要让微孔干燥掉【diào】。

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8. 任何【hé】反【fǎn】应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂【jì】所散【sàn】发的强烈气【qì】体。

9. 不能使用过期产品。

10. 如果可能【néng】传播疾病，所有的【de】样品都应管理好【hǎo】，按【àn】照规定的程【chéng】序处理样品和检测装置【zhì】。

11. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

操作步骤：

1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。

2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

3、加标准【zhǔn】品【pǐn】和【hé】待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上【shàng】，分别设【shè】置标准品孔、待测样本孔和空白对照【zhào】孔【kǒng】，记录【lù】各【gè】孔【kǒng】位置，在标准品孔中【zhōng】加入标准品50μL；待测样本孔中先加【jiā】入待测【cè】样【yàng】本【běn】10μL，再【zài】加样本稀释液【yè】40μL（即样本稀释5倍）；空白对照孔不加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗【xǐ】板：弃去【qù】液体，吸水纸【zhǐ】上拍干，每孔【kǒng】加满洗涤【dí】液，静置1min，甩去洗涤液，吸【xī】水纸上拍干【gàn】，如此重复洗板【bǎn】4次【cì】（也可【kě】用洗板机按【àn】说明书操作洗【xǐ】板）。

6、加酶标工【gōng】作液：每孔【kǒng】加入酶标【biāo】工作液50μL，空白对照孔不加【jiā】。

7、温育：重复4的操作。

8、洗板：重复5的操作。

9、显色【sè】：每【měi】孔【kǒng】先加入显色剂A 液50μL，再加入显色剂B液 50μL，37℃避【bì】光显【xiǎn】色15min。

10、终止：取【qǔ】出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应（颜【yán】色由蓝色立转）。

11、测定【dìng】：以空白孔调【diào】零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的【de】吸【xī】光值【zhí】（OD值）。

12、计算：根据标准品【pǐn】的浓【nóng】度及对应的OD值，计算【suàn】出标准曲线的直线【xiàn】回【huí】归【guī】方程，再根【gēn】据样本的OD值，在【zài】回归方程上计算出对【duì】应的样品浓度【dù】，也可以使用各种应用软件【jiàn】来【lái】计算，终【zhōng】浓度为实际测定【dìng】浓【nóng】度乘以【yǐ】稀释倍数。

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