大鼠 PAI ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品名称：大鼠 PAI ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：96T/48T

库存状态：现货供应

产品保存：低温避光保存

适用范围：仅供使用

运输方式：快递

检测目的：用于测定血清、血浆及相关液体等样本

注意事项

1. 严格按照【zhào】规定的时间和温度进行温育以保证准确结果，使用【yòng】后【hòu】立即【jí】冷【lěng】藏保存试【shì】剂。

2. 洗板不正确可以导致不准确的结果，在【zài】加【jiā】入底【dǐ】物前确保【bǎo】尽量吸干孔内【nèi】液体。

3. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

4. 底【dǐ】物显【xiǎn】色【sè】液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不【bú】能【néng】使【shǐ】用。

5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6. 在储存和【hé】温育时避免强【qiáng】光直接照射【shè】，温育【yù】过程中不要让微孔干【gàn】燥掉。

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8. 任【rèn】何反应试剂不能接触【chù】漂【piāo】白【bái】溶剂或【huò】漂白溶剂【jì】所散发的强烈气体。

9. 不能使用过期产品。

10. 如果可能传播疾病，所【suǒ】有的样品【pǐn】都应【yīng】管【guǎn】理好，按照规定的【de】程序处理样【yàng】品和检测装置。

11. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

操作步骤：

1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。

2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

3、加标准品【pǐn】和待测样本：取足够数量的【de】酶标包被板【bǎn】，固定于框架上，分别设【shè】置标准【zhǔn】品孔、待测样本孔和空白【bái】对照孔，记录各孔位【wèi】置【zhì】，在标准品【pǐn】孔中加入标【biāo】准品50μL；待测样本孔中先加入待【dài】测【cè】样本【běn】10μL，再加【jiā】样本【běn】稀释液40μL（即样本稀【xī】释5倍）；空【kōng】白对照孔不加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去液体，吸水【shuǐ】纸上拍干，每孔加【jiā】满洗涤液，静置1min，甩去洗涤【dí】液，吸水纸上拍干，如【rú】此重【chóng】复洗【xǐ】板【bǎn】4次（也可用洗板机按说明书操作【zuò】洗板）。

6、加酶标工作液【yè】：每孔加入酶标工作液50μL，空白【bái】对【duì】照【zhào】孔不加。

7、温育：重复4的操作。

8、洗板：重复5的操作。

9、显色：每孔先加入显【xiǎn】色剂A 液【yè】50μL，再加【jiā】入显色剂B液【yè】 50μL，37℃避光显色15min。

10、终止：取出酶标板，每孔【kǒng】加终止液50μL，终止【zhǐ】反应（颜色由【yóu】蓝色立【lì】转）。

11、测定：以空【kōng】白孔调零，在终止后【hòu】15分钟内，用450nm波长测【cè】量【liàng】各孔的吸光值【zhí】（OD值）。

12、计【jì】算：根据标【biāo】准品的浓度及【jí】对应的OD值，计算出标准曲【qǔ】线的直线回归方程【chéng】，再根据样【yàng】本的OD值【zhí】，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可【kě】以使用各【gè】种应用软件来计算，终浓度为【wéi】实际【jì】测定【dìng】浓度乘以稀释【shì】倍【bèi】数。

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