大鼠 PLA2 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 PLA2 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取出放【fàng】置30分钟【zhōng】，平衡至【zhì】室温【wēn】，所有标准品和样品必需【xū】设置平行对照实验，快速【sù】加入试剂至【zhì】样品中【zhōng】，立即【jí】漩涡【wō】震【zhèn】荡2秒混匀。

1. 依据实验键【jiàn】盘纸决定酶【méi】标条的使用量【liàng】，将剩余的酶标条连【lián】同干【gàn】燥剂一起放回密封塑【sù】料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至各个微孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结【jié】合）孔。

7. 移取【qǔ】50μL 偶联酶【méi】至各孔【kǒng】中，除【chú】了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗体工【gōng】作液【yè】至各孔中，除了TA（全【quán】活性）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置于【yú】孔【kǒng】板振动器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水【shuǐ】纸上拍干微【wēi】孔【kǒng】内溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每次需拍【pāi】干。

11. 后【hòu】一次洗涤【dí】，清空各微孔，在干净的无尘【chén】吸水纸上【shàng】轻巧酶标板【bǎn】数次，以确保【bǎo】没有洗涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室温【wēn】静置5~30分【fèn】钟。（显色底【dǐ】物【wù】A和B需在【zài】临用前15分钟内【nèi】等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标【biāo】仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光【guāng】密度值，在【zài】570nm至590nm之间好有修正，如果酶标仪不【bú】能自动清除Blank(空白)孔【kǒng】值，那么手动扣【kòu】除每个读【dú】数【shù】的Blank（空白）孔【kǒng】光密度值。

注意事项：

1. 用户【hù】在初次使用试剂盒时，应将各种试剂【jì】管离心数【shù】分钟，以便【biàn】试【shì】剂集中到【dào】管底。

2. 每次【cì】实验留【liú】一【yī】孔作为空白调零孔，该孔不加【jiā】任【rèn】何试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值【zhí】至零。

3. 为防【fáng】止样品蒸【zhēng】发【fā】，试验时将反应板放【fàng】于【yú】铺有湿布的密闭盒内【nèi】，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板【bǎn】或者试剂，请于【yú】9-22℃保存，标准品【pǐn】、生【shēng】物-素标【biāo】记抗体【tǐ】工作【zuò】液、辣根【gēn】过氧【yǎng】化【huà】物酶标记亲和素工【gōng】作液请【qǐng】依据所需的量配置使用，请勿重【chóng】复使用已稀释过的标准品、生【shēng】物-素标记抗体工作液或、辣根过【guò】氧【yǎng】化物酶标【biāo】记亲和素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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