大鼠 RYR3 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 RYR3 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将各【gè】种试剂取【qǔ】出【chū】放置【zhì】30分钟，平衡至【zhì】室温，所有标准【zhǔn】品【pǐn】和样品必需设置平行对照实验，快速加入试剂至样品中，立即漩涡【wō】震荡【dàng】2秒混匀。

1. 依据【jù】实验键盘纸【zhǐ】决定【dìng】酶标条的使用量【liàng】，将剩余的酶标条连【lián】同干【gàn】燥剂一【yī】起放回密封【fēng】塑料袋，密封，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中和液至各个【gè】微孔【kǒng】中，除了TA（全【quán】活性）孔和【hé】Blank（空白）孔。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结【jié】合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶至各孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔【kǒng】和Blank（空白【bái】）孔【kǒng】。

8. 移【yí】取【qǔ】50μL 抗体工作液【yè】至【zhì】各孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔【kǒng】置【zhì】于孔板【bǎn】振【zhèn】动器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水【shuǐ】纸上拍干微孔内溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次【cì】，每次需拍干。

11. 后一次洗涤【dí】，清空各微孔，在干净的无【wú】尘吸水纸上轻【qīng】巧酶标【biāo】板数【shù】次，以确保没有洗涤液残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室【shì】温静置5~30分钟。（显色底物【wù】A和B需在【zài】临用前15分【fèn】钟【zhōng】内等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标仪Blank（空白）孔值【zhí】，读取450nm处【chù】的光密【mì】度值，在570nm至590nm之【zhī】间好有【yǒu】修正，如果酶标仪不能自【zì】动清除Blank(空白)孔值，那么【me】手动扣除每个【gè】读【dú】数【shù】的Blank（空【kōng】白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用【yòng】试【shì】剂盒时，应将各【gè】种试剂管离【lí】心数分钟【zhōng】，以便【biàn】试【shì】剂集中到管底。

2. 每次实验留一【yī】孔作【zuò】为空白调零孔，该孔不加任何试【shì】剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测【cè】量时先用【yòng】此【cǐ】孔调OD值【zhí】至零。

3. 为防【fáng】止样品蒸【zhēng】发，试【shì】验时【shí】将反应板【bǎn】放于铺有湿【shī】布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜【mó】。

4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于9-22℃保存【cún】，标准品【pǐn】、生物-素【sù】标【biāo】记抗【kàng】体工作【zuò】液、辣根过氧【yǎng】化物酶标记亲和素工作液请依据所需【xū】的量配置使【shǐ】用【yòng】，请勿【wù】重复使用已稀释过【guò】的标【biāo】准品、生物-素标记抗体【tǐ】工作液或、辣根【gēn】过氧化【huà】物【wù】酶【méi】标记亲和素工作【zuò】液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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