大鼠 VLDLR ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 VLDLR ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将各种试剂取出【chū】放置【zhì】30分【fèn】钟，平【píng】衡至【zhì】室温，所有标【biāo】准品和【hé】样品必需设【shè】置【zhì】平行对照【zhào】实验，快速加入试剂至样品中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸【zhǐ】决定【dìng】酶【méi】标条的使用量，将剩余的酶标【biāo】条连同【tóng】干【gàn】燥【zào】剂一起放回密封塑【sù】料袋，密封，4℃保存。

2. 移【yí】取50μL中和液至各个微孔中，除了TA（全活【huó】性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔【kǒng】和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特【tè】异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联【lián】酶至各【gè】孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至【zhì】各孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔【kǒng】置于孔【kǒng】板【bǎn】振动器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸上拍【pāi】干【gàn】微孔内溶液，加洗涤液【yè】400μL每孔洗3次【cì】，每【měi】次需拍干。

11. 后一次洗【xǐ】涤，清空各微孔，在干【gàn】净的无【wú】尘吸水纸上【shàng】轻巧酶【méi】标板数次，以【yǐ】确保没有洗涤【dí】液残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色【sè】底物溶液，于室温静【jìng】置5~30分钟。（显色底物A和B需【xū】在临【lín】用前【qián】15分钟【zhōng】内等体积混合，并避光放置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密【mì】度值，在570nm至590nm之间好有修【xiū】正【zhèng】，如果酶标仪不【bú】能自【zì】动清除Blank(空白【bái】)孔值，那【nà】么手动扣【kòu】除每个读数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次【cì】使用试剂盒时，应【yīng】将各种试剂管【guǎn】离【lí】心数分钟，以便试剂【jì】集中到管【guǎn】底。

2. 每【měi】次实【shí】验留一孔作为【wéi】空白调零孔，该孔不加任【rèn】何【hé】试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时【shí】先用此孔调【diào】OD值至零。

3. 为防止样品蒸【zhēng】发，试验【yàn】时【shí】将反应板【bǎn】放于铺有湿布【bù】的密闭【bì】盒内，酶标板加上盖或覆膜【mó】。

4. 未使用完的【de】酶【méi】标【biāo】板【bǎn】或者试剂，请于9-22℃保存，标【biāo】准品、生物【wù】-素标记抗【kàng】体工作液、辣【là】根过氧化【huà】物【wù】酶标记亲和素工作【zuò】液请依【yī】据【jù】所需的【de】量配置使用，请【qǐng】勿重【chóng】复使用已稀释过的标准品、生【shēng】物-素标记抗体工【gōng】作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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