大鼠 TnⅠ ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 TnⅠ ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前【qián】将【jiāng】各种试剂【jì】取出【chū】放置30分钟，平衡至室温【wēn】，所有标准品和样品必需设置平行对照实验，快速加【jiā】入试剂【jì】至【zhì】样品中，立即漩涡震荡【dàng】2秒混匀。

1. 依据实验【yàn】键盘【pán】纸决定酶标条【tiáo】的使用【yòng】量，将剩余【yú】的【de】酶标条【tiáo】连同干燥剂一【yī】起放回密封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个微孔中【zhōng】，除了【le】TA（全【quán】活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特【tè】异结合【hé】）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶【méi】至【zhì】各【gè】孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗体工作【zuò】液至各孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非【fēi】特异结合）孔【kǒng】。

9. 将酶标孔【kǒng】置于【yú】孔板振动器【qì】上，250~500rpm，室【shì】温孵育【yù】2小时。

10. 在吸【xī】水纸【zhǐ】上拍干微孔内溶液，加洗涤液400μL每【měi】孔洗3次，每【měi】次需【xū】拍干。

11. 后【hòu】一次洗涤，清空各微孔，在干净的无尘吸水纸上轻巧酶标【biāo】板数【shù】次【cì】，以【yǐ】确【què】保没有洗【xǐ】涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色【sè】底物溶液，于【yú】室温静置5~30分钟【zhōng】。（显色【sè】底物A和【hé】B需【xū】在临用【yòng】前15分钟内等体积混合，并避光放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪【yí】Blank（空白【bái】）孔值，读取450nm处的光密【mì】度值，在570nm至590nm之间【jiān】好有修【xiū】正，如果酶【méi】标仪不能自动清除Blank(空白)孔值，那么手动扣除每个【gè】读数的Blank（空【kōng】白）孔光密度值【zhí】。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次【cì】使用【yòng】试剂盒时【shí】，应【yīng】将各种试剂管离心数分钟，以便【biàn】试剂集中到管底。

2. 每次【cì】实验【yàn】留一孔作为空白调零孔，该孔【kǒng】不加任何试剂，只是zui后加底物【wù】溶液及2N H2SO4，测量时先【xiān】用此孔调OD值【zhí】至【zhì】零。

3. 为防【fáng】止样品蒸发，试验时【shí】将反应板放【fàng】于铺有湿布的密闭盒内【nèi】，酶标板加【jiā】上盖或覆膜【mó】。

4. 未使用完的酶标板或者【zhě】试剂，请于9-21℃保存，标准品、生【shēng】物-素标记【jì】抗体工作液【yè】、辣根【gēn】过氧【yǎng】化物酶标记亲和素工【gōng】作液请依据所需【xū】的量配置使【shǐ】用，请勿重复使用已稀释【shì】过【guò】的标【biāo】准品、生【shēng】物-素【sù】标记抗体【tǐ】工作液或【huò】、辣根【gēn】过氧化【huà】物酶标记【jì】亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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