大鼠 IL-4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 IL-4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种【zhǒng】试剂取出放【fàng】置【zhì】30分钟，平衡至室温，所有标准【zhǔn】品和样品必【bì】需【xū】设【shè】置平【píng】行对照实验，快速加入试剂【jì】至样品中，立即漩涡【wō】震荡2秒混匀【yún】。

1. 依【yī】据【jù】实验键盘纸决定酶标条【tiáo】的使用量，将【jiāng】剩余的酶标条【tiáo】连同干燥剂一【yī】起放回密【mì】封塑料袋，密封，4℃保存【cún】。

2. 移【yí】取50μL中和液至各个微孔中【zhōng】，除了【le】TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特【tè】异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结【jié】合【hé】）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶至各孔【kǒng】中【zhōng】，除了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体【tǐ】工作液【yè】至各孔中，除了TA（全【quán】活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非【fēi】特异结合）孔。

9. 将酶标孔置于【yú】孔板【bǎn】振动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育【yù】2小时。

10. 在吸【xī】水纸【zhǐ】上拍干微孔内溶液，加洗涤液400μL每【měi】孔洗3次，每次需【xū】拍干。

11. 后【hòu】一【yī】次洗涤，清空各微孔【kǒng】，在干净【jìng】的无尘吸水纸上【shàng】轻巧酶标板数次，以确保没有洗涤【dí】液残【cán】留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底【dǐ】物溶液，于室温静置【zhì】5~30分钟。（显色底物A和B需在【zài】临【lín】用【yòng】前15分钟内等体【tǐ】积【jī】混合，并【bìng】避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值，读取【qǔ】450nm处的光密度值【zhí】，在570nm至590nm之间好有修正，如【rú】果【guǒ】酶标仪不能自动【dòng】清除Blank(空白)孔值，那么手动扣除每【měi】个读【dú】数的【de】Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使【shǐ】用试剂盒时，应【yīng】将各种【zhǒng】试【shì】剂【jì】管离心数分钟【zhōng】，以便试剂集中到【dào】管底。

2. 每次实验留一【yī】孔作为空白调零孔，该孔不加任【rèn】何试剂【jì】，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测【cè】量【liàng】时先用此【cǐ】孔调OD值至零【líng】。

3. 为防止样【yàng】品【pǐn】蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内【nèi】，酶标【biāo】板【bǎn】加上盖或覆【fù】膜。

4. 未【wèi】使用完的酶标【biāo】板或者试剂，请于【yú】9-23℃保存，标【biāo】准品、生【shēng】物-素标记抗【kàng】体工作【zuò】液、辣根过氧化物酶标记亲【qīn】和素【sù】工【gōng】作液请【qǐng】依据【jù】所需的量配置使用，请勿重复使用已稀释过的标准品、生物-素标【biāo】记抗体工【gōng】作【zuò】液或、辣根过氧【yǎng】化【huà】物酶【méi】标记【jì】亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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