大鼠 IFNγ ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 IFNγ ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各【gè】种试【shì】剂取出放置30分钟【zhōng】，平衡至室温，所有标准品【pǐn】和样品必需【xū】设置平【píng】行对【duì】照实验，快速【sù】加入【rù】试剂至样品中【zhōng】，立即漩涡震【zhèn】荡2秒混匀。

1. 依据【jù】实验【yàn】键盘纸【zhǐ】决定酶标条的使用量【liàng】，将剩余【yú】的酶标条连同干燥剂一起放回密封塑【sù】料袋，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至各个微孔【kǒng】中，除【chú】了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结合【hé】）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联【lián】酶至【zhì】各孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移【yí】取【qǔ】50μL 抗体工作液至各孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白【bái】）孔【kǒng】和NSB（非特【tè】异结合【hé】）孔。

9. 将酶标孔置于孔板振【zhèn】动器【qì】上，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时。

10. 在【zài】吸水纸上拍【pāi】干【gàn】微孔内溶液，加洗涤液400μL每【měi】孔洗3次，每次需【xū】拍干。

11. 后一【yī】次洗涤【dí】，清空各【gè】微孔，在干净的无【wú】尘吸水纸【zhǐ】上轻巧酶标板数【shù】次，以确保没有洗【xǐ】涤液残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底【dǐ】物【wù】溶液，于室【shì】温静置5~30分钟。（显色底物A和B需在临用前【qián】15分钟内等体积混合，并避【bì】光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶【méi】标仪Blank（空白【bái】）孔【kǒng】值，读取450nm处的光【guāng】密度值，在【zài】570nm至590nm之间好有修正，如果【guǒ】酶标仪不能【néng】自动清【qīng】除Blank(空白)孔【kǒng】值，那么手动扣【kòu】除每个【gè】读数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使【shǐ】用试【shì】剂【jì】盒时，应将各【gè】种试剂管离心【xīn】数分钟，以便试剂【jì】集中到管底【dǐ】。

2. 每【měi】次实【shí】验留一孔作为空白调零孔，该孔【kǒng】不加任【rèn】何试剂，只【zhī】是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时【shí】先【xiān】用此【cǐ】孔调OD值至零。

3. 为【wéi】防【fáng】止样品蒸发，试验时将反应板放于【yú】铺有【yǒu】湿布的密闭盒内，酶标【biāo】板加【jiā】上盖或覆【fù】膜。

4. 未使用完的【de】酶标【biāo】板或者【zhě】试【shì】剂，请于9-20℃保存，标准品、生物【wù】-素标记抗【kàng】体工作液、辣根过【guò】氧化物酶标【biāo】记亲和素工【gōng】作液请依据所需的量配置使用，请【qǐng】勿【wù】重【chóng】复使【shǐ】用已稀释过的【de】标准品、生物-素标记抗体工作液或【huò】、辣根【gēn】过【guò】氧化物酶标记亲和【hé】素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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