大鼠 β3AR ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 β3AR ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将各种试剂【jì】取【qǔ】出放置30分钟，平【píng】衡至室【shì】温，所有标准品和样品【pǐn】必需设置【zhì】平行对照实验，快【kuài】速加入试剂至样品中，立即【jí】漩涡【wō】震【zhèn】荡2秒混匀【yún】。

1. 依据实验【yàn】键盘纸决定酶【méi】标条的【de】使用量，将剩余的酶标条连同干燥剂一起【qǐ】放回密【mì】封【fēng】塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至各个微【wēi】孔中【zhōng】，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结合)孔【kǒng】和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结合【hé】）孔。

7. 移取50μL 偶【ǒu】联酶至各【gè】孔中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至【zhì】各孔【kǒng】中【zhōng】，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非【fēi】特【tè】异【yì】结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置于孔【kǒng】板振【zhèn】动器上，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时。

10. 在【zài】吸水纸上拍干微孔内溶液【yè】，加洗【xǐ】涤液400μL每孔洗【xǐ】3次，每【měi】次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各【gè】微【wēi】孔，在干净的无尘吸【xī】水纸上轻【qīng】巧酶标板数次，以确【què】保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色底物溶液【yè】，于室温静置5~30分钟【zhōng】。（显色底物A和B需在临用前15分钟内【nèi】等【děng】体积混【hún】合，并【bìng】避光放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶【méi】标【biāo】仪Blank（空白）孔【kǒng】值，读取450nm处【chù】的光密度值，在570nm至590nm之间【jiān】好有修正【zhèng】，如果酶标仪不能自动清除Blank(空【kōng】白)孔【kǒng】值【zhí】，那么手动扣【kòu】除每个读数的Blank（空白）孔光密度值【zhí】。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次使【shǐ】用试剂盒时，应【yīng】将【jiāng】各【gè】种试剂管【guǎn】离心数分钟，以便试剂【jì】集中到管底。

2. 每次实验留一孔作为空白调零孔【kǒng】，该孔不加【jiā】任何【hé】试剂，只是zui后加【jiā】底物溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔【kǒng】调【diào】OD值至零。

3. 为防止样品蒸【zhēng】发，试【shì】验时将反应板放【fàng】于【yú】铺有湿【shī】布的【de】密闭盒【hé】内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完【wán】的酶标板或者试剂，请于9-23℃保【bǎo】存，标准品、生物-素标记抗【kàng】体工【gōng】作【zuò】液【yè】、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依【yī】据所需的量配置使用，请勿重复【fù】使用已稀释过的标准品、生物-素标【biāo】记抗体工作液或、辣根【gēn】过氧【yǎng】化物【wù】酶标记亲【qīn】和素工【gōng】作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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