大鼠 α1AT ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 α1AT ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种【zhǒng】试【shì】剂取出【chū】放置30分钟，平衡至室【shì】温，所有标准品和【hé】样品必需设置【zhì】平行对【duì】照【zhào】实验，快速【sù】加入试剂至样品中，立即漩【xuán】涡震荡2秒混【hún】匀。

1. 依据实【shí】验键盘【pán】纸【zhǐ】决定酶标条的使用【yòng】量，将剩余的酶【méi】标条连【lián】同干燥剂一起放回密封塑料【liào】袋【dài】，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各【gè】个微孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔【kǒng】和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了【le】TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗体工作【zuò】液至各孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】、Blank（空白）孔和NSB（非特【tè】异结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置于孔【kǒng】板振动【dòng】器上，250~500rpm，室温孵育【yù】2小时【shí】。

10. 在吸水纸上【shàng】拍【pāi】干微孔【kǒng】内溶液【yè】，加【jiā】洗涤液400μL每【měi】孔洗3次，每次需拍干。

11. 后一次洗涤【dí】，清【qīng】空各微孔，在干【gàn】净的无尘吸水纸上轻巧【qiǎo】酶标板数次，以确保没有洗【xǐ】涤【dí】液残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室温静置5~30分钟。（显色底物A和【hé】B需在临【lín】用前15分钟内等体积混合【hé】，并避【bì】光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空【kōng】白【bái】）孔值，读取450nm处的光密度值，在570nm至590nm之间好有修正，如果酶标仪不能自动清除Blank(空白)孔值，那么手动【dòng】扣【kòu】除【chú】每【měi】个读数的【de】Blank（空【kōng】白）孔光密【mì】度【dù】值。

注意事项：

1. 用户在【zài】初次使用试剂盒时，应将各种【zhǒng】试剂管【guǎn】离心【xīn】数分钟，以便【biàn】试剂集中【zhōng】到【dào】管底。

2. 每次实验留一孔作【zuò】为空【kōng】白调【diào】零孔，该孔【kǒng】不加任何试剂，只是【shì】zui后加底物溶液【yè】及2N H2SO4，测量时先用此孔【kǒng】调OD值至零。

3. 为防止【zhǐ】样品蒸发，试验时将反应【yīng】板放于铺有【yǒu】湿布的密闭盒内【nèi】，酶标板加【jiā】上【shàng】盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者试剂，请【qǐng】于9-23℃保存，标【biāo】准品、生物-素标记抗体工作液【yè】、辣根过氧化【huà】物酶标记【jì】亲【qīn】和素工作液请依据所需的【de】量配置使用【yòng】，请勿重复使用已稀释过【guò】的标准【zhǔn】品【pǐn】、生物【wù】-素标记抗体【tǐ】工作液或、辣根过氧化物【wù】酶标记亲和【hé】素工作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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