大鼠 CCR1 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 CCR1 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将【jiāng】各【gè】种试剂取【qǔ】出放置30分钟，平衡至室温，所【suǒ】有标【biāo】准品和【hé】样品必需设置平行对【duì】照实验，快【kuài】速加入试【shì】剂【jì】至样品中，立即漩涡震荡2秒混匀【yún】。

1. 依据实验【yàn】键盘【pán】纸决定酶标条的使用量，将剩余的酶标【biāo】条连同干【gàn】燥剂【jì】一起放【fàng】回密【mì】封塑料袋，密封【fēng】，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中和液至各个微孔中，除【chú】了TA（全活性【xìng】）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异结【jié】合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结合）孔。

7. 移取【qǔ】50μL 偶联【lián】酶至各孔中，除了【le】TA（全活性）孔和【hé】Blank（空白）孔【kǒng】。

8. 移取50μL 抗【kàng】体工【gōng】作液至各孔中，除了【le】TA（全活性）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔置于【yú】孔【kǒng】板振动器上，250~500rpm，室【shì】温孵【fū】育2小时。

10. 在吸水【shuǐ】纸上拍【pāi】干微孔【kǒng】内溶液，加洗涤液【yè】400μL每孔洗3次，每次需【xū】拍【pāi】干。

11. 后【hòu】一次洗涤，清空各微孔【kǒng】，在干净【jìng】的无尘吸水纸上轻【qīng】巧【qiǎo】酶标板数次，以确保没【méi】有洗涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色底【dǐ】物溶液，于室温静置【zhì】5~30分钟。（显【xiǎn】色底物A和B需在临用前15分钟内等体积混合【hé】，并【bìng】避光放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标【biāo】仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密度值，在570nm至【zhì】590nm之间【jiān】好有修正，如果酶标仪不能自动【dòng】清除Blank(空【kōng】白【bái】)孔值【zhí】，那么【me】手动扣除【chú】每【měi】个读数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂【jì】管离【lí】心数【shù】分钟【zhōng】，以便试【shì】剂集中到【dào】管底。

2. 每次实验留一孔作【zuò】为空白【bái】调【diào】零孔，该孔不加任何【hé】试剂【jì】，只是zui后加【jiā】底【dǐ】物溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值至【zhì】零【líng】。

3. 为防止样品蒸发【fā】，试验时将【jiāng】反应板放于铺有湿布【bù】的密【mì】闭盒内【nèi】，酶标板加上【shàng】盖【gài】或覆膜。

4. 未使用完的酶标板【bǎn】或者【zhě】试【shì】剂【jì】，请于9-23℃保存，标准品、生物-素标记抗体工作【zuò】液、辣根过氧化物酶标记【jì】亲和【hé】素工【gōng】作液请依【yī】据所需的量配置【zhì】使用【yòng】，请勿重复使用已稀释过的标准品、生【shēng】物-素标【biāo】记抗体工作液或、辣根过氧化物酶【méi】标记亲和素【sù】工【gōng】作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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