大鼠 PCⅢ ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 PCⅢ ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用【yòng】前将【jiāng】各【gè】种试剂取【qǔ】出放置30分钟，平衡至【zhì】室温，所有标准品和【hé】样品必需设置平行对照实验，快【kuài】速加入试剂至样【yàng】品中，立【lì】即漩涡震【zhèn】荡【dàng】2秒混匀。

1. 依【yī】据实【shí】验键盘纸【zhǐ】决定酶标【biāo】条的使用量，将剩余的酶标条【tiáo】连同干燥剂【jì】一起放回密【mì】封【fēng】塑【sù】料袋，密封，4℃保存。

2. 移【yí】取50μL中【zhōng】和液至各个微孔中，除了【le】TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结合)孔和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异【yì】结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔【kǒng】中【zhōng】，除了TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白【bái】）孔【kǒng】。

8. 移取50μL 抗【kàng】体工作液至各【gè】孔中，除【chú】了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非【fēi】特异结合【hé】）孔。

9. 将酶标孔置于【yú】孔【kǒng】板振动器【qì】上，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸【zhǐ】上拍干微孔内溶液，加【jiā】洗涤液400μL每孔洗3次，每次【cì】需拍干【gàn】。

11. 后一【yī】次洗涤，清空【kōng】各微孔，在干净的无尘吸水【shuǐ】纸上轻巧酶【méi】标板数【shù】次，以确保没有洗涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物【wù】溶液，于室温【wēn】静置5~30分钟【zhōng】。（显色底物A和B需在临【lín】用【yòng】前【qián】15分钟【zhōng】内等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标【biāo】仪Blank（空白）孔值【zhí】，读取450nm处的【de】光密度值，在【zài】570nm至590nm之【zhī】间【jiān】好有修正，如果酶标仪不能自动清除Blank(空白)孔值，那么手动扣除每个读数【shù】的Blank（空【kōng】白）孔光【guāng】密【mì】度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂【jì】盒时，应将【jiāng】各种试【shì】剂管离心【xīn】数分【fèn】钟，以便试剂集中到【dào】管底【dǐ】。

2. 每次实【shí】验留一孔【kǒng】作为空白调零【líng】孔，该孔不加任何试剂，只【zhī】是zui后加底物【wù】溶液及2N H2SO4，测量时先用此【cǐ】孔调OD值至【zhì】零。

3. 为【wéi】防止样品蒸发，试验时将反【fǎn】应板放于【yú】铺有湿布的密【mì】闭盒内，酶【méi】标板加【jiā】上盖或覆膜。

4. 未使用【yòng】完的酶标板【bǎn】或者试剂，请于9-23℃保存，标【biāo】准品、生【shēng】物【wù】-素标记抗体工作液、辣根过氧化【huà】物酶标记亲和【hé】素工作【zuò】液【yè】请依据【jù】所需【xū】的量【liàng】配置使用，请勿重复使用已稀释过的标准【zhǔn】品、生物-素标记抗体工作液【yè】或【huò】、辣【là】根过氧化物酶标【biāo】记亲和【hé】素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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