大鼠 STK ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 STK ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂【jì】取出放【fàng】置30分钟，平衡至室温，所有标准品【pǐn】和样品必【bì】需设置平行对照实【shí】验，快速【sù】加入【rù】试剂至【zhì】样品中，立即漩涡震荡2秒混匀【yún】。

1. 依据【jù】实【shí】验键【jiàn】盘纸决定酶标条【tiáo】的使用量【liàng】，将剩余的酶标【biāo】条连同干【gàn】燥剂一起放回密封塑料袋，密【mì】封，4℃保存。

2. 移【yí】取【qǔ】50μL中和液至各个微孔中，除了TA（全活性）孔和【hé】Blank（空白【bái】）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结【jié】合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶【méi】至各孔中【zhōng】，除【chú】了TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各【gè】孔【kǒng】中，除了TA（全活【huó】性【xìng】）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结【jié】合）孔。

9. 将酶标孔【kǒng】置于孔【kǒng】板【bǎn】振动器上，250~500rpm，室温孵育2小时【shí】。

10. 在吸水【shuǐ】纸上拍干微【wēi】孔【kǒng】内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在干【gàn】净的无尘吸【xī】水纸【zhǐ】上轻巧酶标板数【shù】次，以确保没【méi】有洗涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色底物溶【róng】液，于室温静置5~30分钟【zhōng】。（显色底物A和B需【xū】在临用前15分钟内等体【tǐ】积【jī】混合，并避光放置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空【kōng】白）孔值，读取450nm处的光密【mì】度值，在570nm至590nm之间好有修正【zhèng】，如【rú】果酶标仪【yí】不【bú】能【néng】自动清除Blank(空白)孔【kǒng】值，那么手【shǒu】动扣除每个读数的Blank（空【kōng】白）孔光密【mì】度值。

注意事项：

1. 用户在【zài】初次【cì】使用试剂盒【hé】时，应将各种试剂管离心数分【fèn】钟，以便试剂集中到【dào】管【guǎn】底【dǐ】。

2. 每次实验留一孔作为【wéi】空【kōng】白调零孔，该孔不加【jiā】任何【hé】试【shì】剂，只是zui后加底物溶【róng】液及2N H2SO4，测【cè】量时先用【yòng】此孔调OD值至【zhì】零。

3. 为防止【zhǐ】样品蒸【zhēng】发【fā】，试验时将反应板放【fàng】于铺有湿布的【de】密闭盒【hé】内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完【wán】的酶标板或者试剂，请于9-24℃保存，标准品、生物【wù】-素标【biāo】记【jì】抗体【tǐ】工作液【yè】、辣【là】根【gēn】过氧【yǎng】化物酶标记【jì】亲和素工作液请【qǐng】依据所需的【de】量配置使用，请勿重复使用已稀释过的标准品【pǐn】、生物-素标记抗体【tǐ】工作液或【huò】、辣根过氧化物【wù】酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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