小鼠 COL1 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

名  称：小鼠 COL1 ELISA试剂盒 （酶联免疫检测法）

英　文： COL1 ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预【yù】期【qī】应用：ELISA法定量测定【dìng】血清、血浆【jiāng】、细胞培养【yǎng】上清或其它相关生【shēng】物液【yè】体中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实【shí】验【yàn】中不用的板条【tiáo】应立即放【fàng】回【huí】包装袋中，密【mì】封保存，以免变质。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸取终止液和【hé】底【dǐ】物A、B液时，避免使【shǐ】用带金属部【bù】分的加样器。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标准品【pǐn】：标准品【pǐn】的系列稀释应【yīng】在实验时【shí】准备，不能储存，稀释前将标准品振【zhèn】荡混匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据待测样品数量加上标准【zhǔn】品的数量决定所需【xū】的【de】板条数，每个【gè】标【biāo】准品和【hé】空白孔【kǒng】建议做复孔。

5)每个样品根据自己的【de】数量来定，能使用复孔【kǒng】的尽【jìn】量【liàng】做复孔，标本用标【biāo】本稀释液1:1稀【xī】释后【hòu】加入50ul于反应孔内。

6)加入稀释好后的标准品【pǐn】50ul于反【fǎn】应孔【kǒng】、加【jiā】入待测样品50ul于反【fǎn】应孔内。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩去【qù】孔内液体【tǐ】，每孔加满洗涤【dí】液，振【zhèn】荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍【pāi】干，重复此操作3次。

9)每孔加入80ul的【de】亲【qīn】和链【liàn】酶素-HRP，轻轻振荡【dàng】混匀，37℃温育30分钟。

10)甩去【qù】孔内液【yè】体，每孔加【jiā】满洗涤【dí】液，振荡30秒【miǎo】，甩去洗涤液，用吸【xī】水纸拍【pāi】干。重复此操作3次【cì】。

11)每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育【yù】10分【fèn】钟【zhōng】，避免光【guāng】照。

12)取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入【rù】终止液后应立【lì】即【jí】测定结果【guǒ】。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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