大鼠GastrinELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠GastrinELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前【qián】将各种试剂取【qǔ】出放置30分钟，平衡至室温【wēn】，所有标准品和样品必需设置平行【háng】对照【zhào】实验【yàn】，快速加入试剂【jì】至样品【pǐn】中，立即【jí】漩涡震荡2秒【miǎo】混匀【yún】。

1. 依据【jù】实验键盘纸【zhǐ】决定酶标条的使【shǐ】用量，将剩【shèng】余的酶标条【tiáo】连同干燥剂一起放回密封塑料袋，密封，4℃保【bǎo】存【cún】。

2. 移取50μL中和液至【zhì】各个【gè】微孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

3. 移【yí】取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异【yì】结合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液【yè】至各孔【kǒng】中，除了TA（全【quán】活性）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非【fēi】特异结合）孔。

9. 将酶标孔置【zhì】于【yú】孔板振【zhèn】动器上，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸上拍干微孔内溶【róng】液，加洗【xǐ】涤液400μL每【měi】孔洗3次，每次【cì】需拍干。

11. 后一【yī】次【cì】洗涤，清【qīng】空各微孔，在干【gàn】净的无尘吸水【shuǐ】纸上轻巧酶【méi】标板数次，以确保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色【sè】底物【wù】溶液，于室温静置5~30分钟。（显色底【dǐ】物A和B需【xū】在临用前【qián】15分钟内【nèi】等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标【biāo】仪Blank（空白）孔值，读取【qǔ】450nm处的光密【mì】度值，在【zài】570nm至590nm之间好有【yǒu】修【xiū】正，如果酶标仪不能自动清除Blank(空白【bái】)孔值，那么手动扣除每个读【dú】数的Blank（空【kōng】白【bái】）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户【hù】在【zài】初次【cì】使用【yòng】试剂盒时，应将各种试【shì】剂管离心数分钟，以【yǐ】便试剂集中【zhōng】到管底。

2. 每次实【shí】验【yàn】留【liú】一【yī】孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是【shì】zui后加底物【wù】溶液及2N H2SO4，测【cè】量【liàng】时先用此孔调OD值至零。

3. 为防【fáng】止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿【shī】布的密【mì】闭【bì】盒内，酶标板加上【shàng】盖或覆膜【mó】。

4. 未【wèi】使用完的酶标板或者试剂，请于【yú】9-22℃保存【cún】，标准品、生物【wù】-素标记【jì】抗体【tǐ】工作液、辣根过氧化物酶标【biāo】记亲和素工作【zuò】液请依【yī】据所需的量【liàng】配【pèi】置使用，请勿重复使用【yòng】已稀释过的标准品【pǐn】、生【shēng】物-素标记抗体工【gōng】作液或、辣【là】根过氧化物酶标记亲【qīn】和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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