大鼠 EDA ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 EDA ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将各【gè】种试剂取出放【fàng】置【zhì】30分钟，平【píng】衡至【zhì】室温【wēn】，所有【yǒu】标准品和样品必需设置平行对照实验，快速【sù】加入试剂至样品中，立即漩【xuán】涡震荡2秒混匀。

1. 依【yī】据实【shí】验键盘纸决【jué】定酶标条【tiáo】的使用量【liàng】，将【jiāng】剩余的酶标条连同干燥【zào】剂一起放【fàng】回密封塑【sù】料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个微【wēi】孔中，除【chú】了【le】TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特【tè】异结合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非【fēi】特异结合）孔【kǒng】。

7. 移取50μL 偶联酶至【zhì】各孔【kǒng】中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体【tǐ】工作液至各孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合【hé】）孔。

9. 将酶【méi】标【biāo】孔置于孔板振动器【qì】上【shàng】，250~500rpm，室温孵育【yù】2小时。

10. 在【zài】吸水【shuǐ】纸上拍干微孔内溶液，加【jiā】洗涤液400μL每【měi】孔洗3次，每次【cì】需拍干。

11. 后一次洗涤，清【qīng】空各微孔，在干净的【de】无尘吸水【shuǐ】纸上轻【qīng】巧酶标板【bǎn】数次，以确保没【méi】有【yǒu】洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色【sè】底物溶【róng】液，于室温静【jìng】置5~30分钟。（显色【sè】底物A和B需在临用前15分【fèn】钟内等【děng】体积混合，并避光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶【méi】标仪Blank（空白）孔值，读取【qǔ】450nm处的光密【mì】度【dù】值，在570nm至590nm之间好有修正，如果酶标仪【yí】不能自动清除Blank(空白)孔值，那么手【shǒu】动扣除【chú】每个读数的Blank（空白【bái】）孔光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂【jì】盒时，应将各种【zhǒng】试【shì】剂【jì】管离心数分钟，以【yǐ】便试【shì】剂集中到管底。

2. 每次实验留一孔作为【wéi】空白调零孔，该孔不加任【rèn】何试剂，只是zui后加底物溶液及【jí】2N H2SO4，测量时【shí】先用【yòng】此孔调【diào】OD值【zhí】至零。

3. 为防止样品蒸发，试验时将反【fǎn】应板放于铺【pù】有湿【shī】布的密闭盒内，酶标板【bǎn】加上【shàng】盖或【huò】覆膜。

4. 未使用【yòng】完的酶标板或者试剂【jì】，请于9-22℃保存，标准品、生【shēng】物-素【sù】标记抗【kàng】体【tǐ】工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所【suǒ】需的量配置使用【yòng】，请【qǐng】勿重【chóng】复【fù】使用已稀释过的标准品、生【shēng】物【wù】-素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标【biāo】记【jì】亲和【hé】素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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