大鼠 CA2+ ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 CA2+ ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取出放置30分钟，平衡至室温【wēn】，所有标【biāo】准品和样品必需【xū】设置平【píng】行对【duì】照实验【yàn】，快速【sù】加入试剂【jì】至样【yàng】品中，立即漩涡【wō】震荡【dàng】2秒混匀。

1. 依据实验【yàn】键盘纸决定酶标条【tiáo】的使用量，将【jiāng】剩余【yú】的酶标条连同干燥剂一起放【fàng】回密【mì】封【fēng】塑料袋【dài】，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至各个微孔【kǒng】中，除【chú】了TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合【hé】)孔和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特【tè】异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶【méi】至各孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白【bái】）孔【kǒng】和NSB（非特异【yì】结【jié】合【hé】）孔。

9. 将酶标孔【kǒng】置于孔板振动【dòng】器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小时。

10. 在吸水纸上拍【pāi】干微孔内溶液，加洗【xǐ】涤液400μL每孔洗3次，每次需【xū】拍干【gàn】。

11. 后一次洗涤，清空各微孔【kǒng】，在干净的【de】无尘吸水纸上轻巧酶标板【bǎn】数【shù】次【cì】，以【yǐ】确保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色底【dǐ】物【wù】溶液，于室温静置5~30分【fèn】钟【zhōng】。（显色底物A和B需在临用前15分钟【zhōng】内等【děng】体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除【chú】酶标仪Blank（空白）孔值【zhí】，读取450nm处的光【guāng】密度值，在【zài】570nm至【zhì】590nm之间好有【yǒu】修正，如果酶标仪不【bú】能自动清除Blank(空白)孔值，那么手动扣除【chú】每个读数的【de】Blank（空白）孔光【guāng】密度【dù】值。

注意事项：

1. 用户【hù】在初【chū】次使【shǐ】用试【shì】剂盒时，应将各种试剂管离心数【shù】分钟【zhōng】，以便试剂集中到管底。

2. 每次【cì】实验留一【yī】孔作为空白调零孔，该【gāi】孔【kǒng】不加任何试剂，只是zui后加【jiā】底物溶液及2N H2SO4，测量时【shí】先用此孔调OD值至【zhì】零。

3. 为防止【zhǐ】样品蒸【zhēng】发，试验【yàn】时将反应板放【fàng】于铺有湿布的密闭盒内，酶标【biāo】板加上盖或【huò】覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者试【shì】剂，请于9-22℃保存【cún】，标【biāo】准品、生物-素标记抗【kàng】体工【gōng】作液、辣【là】根过氧化物【wù】酶标记亲和素工【gōng】作液【yè】请依据所需的量配置【zhì】使用，请勿重复使用已稀释过的【de】标准品、生【shēng】物【wù】-素标记抗【kàng】体工作液或、辣根过氧化物【wù】酶标记亲【qīn】和【hé】素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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