大鼠 cOC ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 cOC ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将各种试剂取出放置30分钟，平衡【héng】至室温，所有标【biāo】准品和样品【pǐn】必【bì】需设【shè】置平行对照实【shí】验，快速【sù】加入试剂【jì】至样品中，立即漩【xuán】涡震荡2秒混匀【yún】。

1. 依据【jù】实验键盘纸决定酶标【biāo】条的使【shǐ】用量，将剩【shèng】余的酶标条连同干【gàn】燥剂一【yī】起放回【huí】密封塑【sù】料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个【gè】微【wēi】孔【kǒng】中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异【yì】结合)孔【kǒng】和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结【jié】合【hé】）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】。

8. 移取50μL 抗体工作液至各【gè】孔中，除了【le】TA（全活【huó】性）孔、Blank（空白【bái】）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将【jiāng】酶标孔置于孔板【bǎn】振动器上【shàng】，250~500rpm，室温孵育2小时【shí】。

10. 在吸水纸上拍干微【wēi】孔内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每孔洗【xǐ】3次【cì】，每【měi】次【cì】需拍干。

11. 后一次洗【xǐ】涤，清【qīng】空各微孔，在【zài】干【gàn】净的【de】无尘吸水纸上【shàng】轻巧酶标板数次，以确保没有洗涤液残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室温静【jìng】置5~30分【fèn】钟。（显色底物A和B需在临用前15分钟内等体积混合【hé】，并避【bì】光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白【bái】）孔【kǒng】值，读【dú】取450nm处的光密度值，在570nm至590nm之【zhī】间【jiān】好有修正，如【rú】果酶标仪不能自动清【qīng】除【chú】Blank(空白【bái】)孔值，那么手动【dòng】扣除【chú】每【měi】个读数的Blank（空白）孔光密度值【zhí】。

注意事项：

1. 用【yòng】户【hù】在初次使用试剂盒【hé】时，应将【jiāng】各种试剂管离心数分钟，以便【biàn】试【shì】剂集中到【dào】管底。

2. 每次实验留一孔【kǒng】作为空【kōng】白调零【líng】孔，该孔不加任何试剂，只【zhī】是【shì】zui后【hòu】加底物溶液及【jí】2N H2SO4，测量时先【xiān】用此孔调OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布【bù】的【de】密闭盒内，酶【méi】标【biāo】板【bǎn】加【jiā】上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者【zhě】试剂【jì】，请于9-22℃保存【cún】，标准品、生【shēng】物-素标记抗体【tǐ】工作液【yè】、辣根【gēn】过【guò】氧化物酶标记亲和【hé】素工【gōng】作液请依据所需【xū】的量【liàng】配置使用，请勿重【chóng】复使用已稀释过的标准品、生物-素【sù】标记抗体工作液或、辣根过氧【yǎng】化物酶【méi】标记【jì】亲和【hé】素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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