大鼠 OMgp ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 OMgp ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将各种【zhǒng】试剂取【qǔ】出放置30分钟，平衡至室温，所有标【biāo】准品和样品【pǐn】必需设置平行对照实验【yàn】，快【kuài】速加【jiā】入试剂至样品中，立【lì】即漩涡震【zhèn】荡2秒【miǎo】混【hún】匀。

1. 依据实验键盘纸决【jué】定【dìng】酶标条的使用量【liàng】，将剩余【yú】的【de】酶标条连同【tóng】干燥剂一起【qǐ】放回密封塑料袋【dài】，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至【zhì】各【gè】个微孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特【tè】异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了【le】TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗体工作液至各孔中【zhōng】，除了TA（全活【huó】性）孔、Blank（空白【bái】）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔置于孔板振动器【qì】上，250~500rpm，室温【wēn】孵【fū】育2小时【shí】。

10. 在【zài】吸水纸【zhǐ】上拍干微孔【kǒng】内溶液，加洗涤液400μL每【měi】孔洗3次，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在干净【jìng】的【de】无尘吸水【shuǐ】纸上轻巧酶标板【bǎn】数【shù】次，以确保没有【yǒu】洗涤液残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色【sè】底物溶液，于室温静置5~30分钟【zhōng】。（显色底【dǐ】物【wù】A和B需在临用前15分钟内等体积【jī】混【hún】合【hé】，并避光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标仪【yí】Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密度值【zhí】，在570nm至590nm之间好有修正，如果酶标【biāo】仪不【bú】能【néng】自动清【qīng】除Blank(空白【bái】)孔值，那么手动【dòng】扣除每个【gè】读数的Blank（空【kōng】白）孔光密度值【zhí】。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初【chū】次【cì】使【shǐ】用试剂盒时【shí】，应将各种试剂管离心数分钟【zhōng】，以便试剂集【jí】中到管底。

2. 每次实验留一孔【kǒng】作为空白调【diào】零孔，该孔不加任何【hé】试【shì】剂，只【zhī】是zui后加底物溶【róng】液及2N H2SO4，测量【liàng】时先用此孔调【diào】OD值至零【líng】。

3. 为防止样【yàng】品蒸发，试验时将反应【yīng】板放于铺有【yǒu】湿布【bù】的【de】密闭【bì】盒内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶【méi】标板或者试剂【jì】，请于【yú】9-22℃保存【cún】，标准【zhǔn】品【pǐn】、生物-素标记抗体工作液【yè】、辣根过【guò】氧化物酶标记亲和素工作液请依据【jù】所需【xū】的量配置使用【yòng】，请勿重复使用已【yǐ】稀释过【guò】的标准品、生物-素标记抗【kàng】体【tǐ】工【gōng】作液或、辣根过氧化物酶【méi】标记亲和素【sù】工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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