大鼠 GFAP ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 GFAP ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将各种试剂【jì】取出放置30分钟，平衡至【zhì】室温，所有标准【zhǔn】品【pǐn】和样品【pǐn】必需设置【zhì】平行对照实验，快速加入试剂【jì】至【zhì】样品中，立即漩涡震荡2秒【miǎo】混匀【yún】。

1. 依据【jù】实验键盘纸决定酶标条【tiáo】的使【shǐ】用量，将剩【shèng】余的【de】酶标条连同干燥剂一起放回密封塑料【liào】袋，密【mì】封，4℃保存。

2. 移【yí】取50μL中和【hé】液至各个微【wēi】孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异【yì】结【jié】合）孔【kǒng】。

7. 移取50μL 偶联酶至各【gè】孔【kǒng】中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体工【gōng】作液至各孔中，除了TA（全活【huó】性）孔、Blank（空白【bái】）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔置【zhì】于孔板【bǎn】振动器上，250~500rpm，室温孵育2小时【shí】。

10. 在吸水【shuǐ】纸上【shàng】拍干微孔内溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每次需拍【pāi】干。

11. 后一【yī】次洗【xǐ】涤，清空各微【wēi】孔【kǒng】，在干净的无尘吸水纸上轻巧酶标板数【shù】次，以确保【bǎo】没有洗涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底物溶【róng】液【yè】，于室温静置5~30分钟。（显【xiǎn】色底物【wù】A和B需【xū】在临用前15分钟内等体【tǐ】积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标【biāo】仪Blank（空白）孔值，读取450nm处【chù】的【de】光密度值，在【zài】570nm至【zhì】590nm之间好【hǎo】有修正，如果酶标仪【yí】不能自动【dòng】清除【chú】Blank(空白)孔值，那么手动扣除每【měi】个【gè】读数【shù】的【de】Blank（空白）孔光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用【yòng】试剂盒时，应将各种试【shì】剂管离心数分【fèn】钟【zhōng】，以便【biàn】试剂集中【zhōng】到管【guǎn】底。

2. 每次实验留【liú】一孔作为空【kōng】白调零孔，该孔不加【jiā】任何试剂，只【zhī】是zui后加底物【wù】溶液及2N H2SO4，测【cè】量【liàng】时先【xiān】用此孔调OD值至零。

3. 为防止【zhǐ】样品蒸发，试验时将反【fǎn】应板放【fàng】于铺有湿布的密闭【bì】盒内，酶【méi】标板加上盖【gài】或覆膜【mó】。

4. 未【wèi】使用完的酶标【biāo】板或者【zhě】试【shì】剂，请于9-20℃保【bǎo】存，标准【zhǔn】品、生物-素标记抗体工作液、辣根过【guò】氧化【huà】物酶标【biāo】记亲和素工作液请【qǐng】依据所【suǒ】需的量配置使用，请【qǐng】勿重复使用【yòng】已【yǐ】稀释过【guò】的标准品、生【shēng】物-素标记抗体工【gōng】作液或、辣根【gēn】过氧化物酶标记亲【qīn】和素工【gōng】作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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