大鼠 DHEA ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 DHEA ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将【jiāng】各种试【shì】剂取出【chū】放置30分钟，平衡至【zhì】室温【wēn】，所【suǒ】有标准品和样品必需设置平行对照实验，快【kuài】速加入试剂至样【yàng】品中【zhōng】，立即【jí】漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸【zhǐ】决【jué】定酶标条的使用量，将剩余的【de】酶标条连同干燥剂【jì】一起放【fàng】回【huí】密封塑料袋，密封【fēng】，4℃保存【cún】。

2. 移取【qǔ】50μL中和液至各个微【wēi】孔【kǒng】中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结【jié】合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结合【hé】）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各【gè】孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

8. 移取50μL 抗体【tǐ】工【gōng】作液至各孔中，除【chú】了TA（全活【huó】性）孔【kǒng】、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔【kǒng】置【zhì】于孔板振动器【qì】上【shàng】，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在【zài】吸水纸上拍干微孔内溶液【yè】，加洗涤液400μL每孔洗3次，每【měi】次【cì】需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔【kǒng】，在干净的无尘吸【xī】水纸上轻巧酶标【biāo】板数【shù】次，以确【què】保没有洗【xǐ】涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶【róng】液，于室温【wēn】静置5~30分【fèn】钟。（显色底物A和【hé】B需在临用前15分钟内【nèi】等体【tǐ】积混合，并【bìng】避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】值【zhí】，读【dú】取450nm处【chù】的光密【mì】度值【zhí】，在570nm至590nm之间好有【yǒu】修【xiū】正，如【rú】果酶标仪不能【néng】自动清除Blank(空白)孔值，那么手动扣除每【měi】个【gè】读数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在【zài】初【chū】次使用试剂盒时，应将各种试剂【jì】管离心数分钟，以【yǐ】便【biàn】试剂集中到【dào】管【guǎn】底。

2. 每次实验留一孔作为空【kōng】白调零孔，该孔不加任何试剂，只是zui后【hòu】加底物溶液及2N H2SO4，测【cè】量【liàng】时先用此孔调OD值至【zhì】零【líng】。

3. 为【wéi】防止样品蒸发，试验【yàn】时将反应【yīng】板放于铺有湿布的密闭盒内【nèi】，酶标板【bǎn】加上盖或【huò】覆膜。

4. 未使用完的酶标板【bǎn】或者试剂，请于【yú】9-20℃保存【cún】，标准【zhǔn】品、生物-素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素【sù】工作液请【qǐng】依据所需的量配置使用，请勿【wù】重复使用已稀释过【guò】的标【biāo】准品、生物-素标记抗体工作【zuò】液【yè】或、辣【là】根过氧化物酶标【biāo】记亲和素【sù】工【gōng】作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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