大鼠SRBCD36ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠SRBCD36ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将各种【zhǒng】试剂取出放置30分钟，平【píng】衡【héng】至室温，所有标准品和【hé】样品必【bì】需【xū】设【shè】置平行对照【zhào】实验，快速加入试剂至样品中，立即【jí】漩涡震【zhèn】荡2秒混匀。

1. 依【yī】据实验键盘纸决定酶标条的使【shǐ】用量【liàng】，将剩余的酶标条连同干燥剂一【yī】起放回密封塑【sù】料【liào】袋，密封，4℃保存。

2. 移取【qǔ】50μL中和液【yè】至各个微孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔【kǒng】和Blank（空白）孔【kǒng】。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异结【jié】合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取【qǔ】50μL 偶联酶【méi】至各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作【zuò】液至各孔中，除了TA（全【quán】活性）孔、Blank（空白）孔和【hé】NSB（非【fēi】特【tè】异结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置于孔板振动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小时【shí】。

10. 在吸水纸上【shàng】拍干微孔内溶液，加【jiā】洗涤液400μL每孔洗【xǐ】3次，每次【cì】需拍干。

11. 后一次洗涤【dí】，清空各微【wēi】孔，在【zài】干净的无【wú】尘吸水纸【zhǐ】上轻巧酶标板数次，以确保没有洗【xǐ】涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物【wù】溶液，于室温静置5~30分【fèn】钟。（显色底物A和B需【xū】在临【lín】用前15分钟【zhōng】内等体积混【hún】合，并避光放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪【yí】Blank（空【kōng】白）孔值，读取450nm处的光密【mì】度值【zhí】，在570nm至590nm之间好有修正，如【rú】果酶标仪不能【néng】自动清【qīng】除Blank(空白)孔值，那【nà】么【me】手动扣【kòu】除【chú】每个【gè】读数的Blank（空白）孔【kǒng】光密度值。

注意事项：

1. 用户【hù】在初次【cì】使【shǐ】用试【shì】剂盒时，应将各种试剂管【guǎn】离心数分钟，以便试【shì】剂集中到管底。

2. 每次【cì】实验留一孔作为空【kōng】白调零【líng】孔，该孔不加任何试剂，只是zui后加底【dǐ】物【wù】溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔调【diào】OD值【zhí】至零【líng】。

3. 为防止样品蒸发，试验时【shí】将反【fǎn】应板放【fàng】于【yú】铺有湿布【bù】的【de】密【mì】闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶【méi】标【biāo】板或者试剂，请于9-22℃保存【cún】，标准品、生物-素【sù】标记抗体工作液【yè】、辣根过【guò】氧【yǎng】化物酶标记亲和素工作液请依据所【suǒ】需【xū】的量配置使用，请【qǐng】勿【wù】重【chóng】复使用已稀释过的标准品、生物-素标记【jì】抗体工【gōng】作液或、辣根过【guò】氧化物酶标记亲和素【sù】工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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