大鼠 CYPA ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 CYPA ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各【gè】种试剂取【qǔ】出放置30分钟，平衡至室温，所【suǒ】有标准品和样品必【bì】需【xū】设置平行对照实验，快速加入试剂至【zhì】样品中，立即漩【xuán】涡【wō】震荡2秒【miǎo】混匀。

1. 依据实验键盘纸决定酶【méi】标【biāo】条的使用量，将剩余的酶标条【tiáo】连【lián】同干燥【zào】剂一起放【fàng】回密封塑料袋，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取【qǔ】50μL中和液至各个微孔中【zhōng】，除了TA（全活【huó】性）孔和【hé】Blank（空白）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合【hé】)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联【lián】酶【méi】至各【gè】孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗【kàng】体【tǐ】工作液【yè】至各孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】、Blank（空白）孔和NSB（非特【tè】异【yì】结合）孔。

9. 将酶标孔置于【yú】孔【kǒng】板【bǎn】振动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小【xiǎo】时。

10. 在吸【xī】水纸上拍【pāi】干微孔内【nèi】溶液，加洗【xǐ】涤液400μL每孔洗3次【cì】，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在干【gàn】净的无尘吸水纸上轻巧【qiǎo】酶标板数次，以确保【bǎo】没有【yǒu】洗涤【dí】液残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于【yú】室温静置5~30分钟。（显色【sè】底物A和B需在临用前【qián】15分钟内【nèi】等体积【jī】混【hún】合【hé】，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标仪Blank（空白）孔值，读取【qǔ】450nm处的光密度值，在570nm至590nm之间好有修【xiū】正，如果【guǒ】酶标仪不能自【zì】动【dòng】清除Blank(空【kōng】白【bái】)孔值，那么手【shǒu】动【dòng】扣除每个读数【shù】的Blank（空【kōng】白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时，应【yīng】将各种试剂管离【lí】心数分【fèn】钟，以便试剂【jì】集中到管【guǎn】底。

2. 每【měi】次实验留一【yī】孔作【zuò】为【wéi】空白调零孔，该【gāi】孔不加任何试剂，只是zui后加【jiā】底物【wù】溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值【zhí】至零。

3. 为防【fáng】止样品蒸发，试验时将【jiāng】反应板放于铺【pù】有【yǒu】湿布的密闭盒内，酶标板加上盖【gài】或【huò】覆膜。

4. 未使用完【wán】的酶标【biāo】板或者试剂，请于9-22℃保存，标准品、生【shēng】物-素标记【jì】抗体工作液【yè】、辣根【gēn】过【guò】氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用，请勿重复使用已稀释过的标准【zhǔn】品【pǐn】、生物-素标【biāo】记抗体工作液【yè】或、辣根【gēn】过氧化物酶标记亲【qīn】和【hé】素工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

大鼠 CYPA ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）由【yóu】上海酶联【lián】生物【wù】现货【huò】供应，包括【kuò】CYPA ELISA试剂盒、酶联免疫检【jiǎn】测试剂盒说明书、实验原理、操作【zuò】步骤等【děng】产【chǎn】品详细介绍。