大鼠 PEG2 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 PEG2 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将各种试剂取【qǔ】出【chū】放置30分钟【zhōng】，平衡至【zhì】室温【wēn】，所【suǒ】有标准【zhǔn】品和样品必需设置平行【háng】对照实【shí】验，快【kuài】速加入试剂至样品中，立即漩涡震荡2秒混匀【yún】。

1. 依据实【shí】验键【jiàn】盘【pán】纸决【jué】定酶标条的使用量，将剩余【yú】的【de】酶标条连同干燥剂一起放回密【mì】封塑料袋，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至【zhì】各【gè】个微孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特异【yì】结【jié】合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体【tǐ】工作【zuò】液至【zhì】各孔中，除了【le】TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结【jié】合）孔【kǒng】。

9. 将酶标孔【kǒng】置于孔板振【zhèn】动器上，250~500rpm，室温孵【fū】育2小时。

10. 在吸【xī】水纸【zhǐ】上拍干【gàn】微孔内溶液，加洗【xǐ】涤液【yè】400μL每孔洗【xǐ】3次，每次需拍干。

11. 后一次洗【xǐ】涤，清空【kōng】各【gè】微孔【kǒng】，在干净的无尘【chén】吸水纸上轻巧酶标板【bǎn】数次，以确【què】保没有洗涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底【dǐ】物溶液，于室温【wēn】静置5~30分【fèn】钟。（显色底物A和B需在临用【yòng】前15分钟内等体积【jī】混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标【biāo】仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密度值，在570nm至590nm之间好有修正，如【rú】果酶标仪不能自动清除Blank(空白)孔【kǒng】值，那么手动扣除每个读【dú】数【shù】的【de】Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂【jì】管离心【xīn】数分【fèn】钟，以便试剂集【jí】中到管底。

2. 每次实【shí】验【yàn】留【liú】一孔作为空白调零孔，该孔不【bú】加任何试剂，只是zui后加底【dǐ】物溶液【yè】及2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值【zhí】至零。

3. 为【wéi】防【fáng】止样品蒸【zhēng】发【fā】，试验【yàn】时将反应板放于铺有湿布的【de】密闭盒内，酶标板加上【shàng】盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板【bǎn】或者试剂，请于9-22℃保存，标准【zhǔn】品、生物-素标记抗【kàng】体【tǐ】工作液【yè】、辣根过氧化物酶标记【jì】亲和素工作液【yè】请依据所【suǒ】需【xū】的量配置使用，请勿重复【fù】使用已稀释过【guò】的标准品【pǐn】、生【shēng】物-素【sù】标记抗体工作液或【huò】、辣根【gēn】过氧化物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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