大鼠 Dyn ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 Dyn ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种【zhǒng】试剂取出放置【zhì】30分【fèn】钟，平衡至室温，所有标准品和样【yàng】品必需设【shè】置平行对照实【shí】验，快速加入试剂至样【yàng】品中，立【lì】即漩涡震荡【dàng】2秒混【hún】匀。

1. 依据实验键【jiàn】盘纸决【jué】定【dìng】酶标条的【de】使用量，将【jiāng】剩余的酶标条连【lián】同干燥【zào】剂一起放回密封塑料袋【dài】，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个微【wēi】孔中，除了TA（全活性）孔和【hé】Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异【yì】结合）孔【kǒng】。

7. 移取50μL 偶联酶【méi】至各孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗体工【gōng】作液至各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置于孔【kǒng】板振动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小时。

10. 在吸【xī】水纸【zhǐ】上拍干【gàn】微【wēi】孔内溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次【cì】，每次【cì】需拍干。

11. 后【hòu】一次洗涤，清空各微孔【kǒng】，在干净的无尘吸【xī】水纸上轻巧酶标板数次，以确【què】保【bǎo】没有【yǒu】洗涤液残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底【dǐ】物溶液，于【yú】室温静置5~30分钟。（显【xiǎn】色底物A和B需在【zài】临【lín】用【yòng】前15分钟内等【děng】体积混合，并【bìng】避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶标仪Blank（空【kōng】白）孔值，读取450nm处的光密【mì】度值，在【zài】570nm至590nm之间好有修正，如果【guǒ】酶标仪不能自动清【qīng】除Blank(空白【bái】)孔值，那么手动扣除【chú】每【měi】个读【dú】数的Blank（空白）孔光密度【dù】值。

注意事项：

1. 用户在初次使【shǐ】用试剂盒时，应【yīng】将【jiāng】各【gè】种【zhǒng】试剂【jì】管离心数分【fèn】钟，以便试剂集中到管底。

2. 每次实验留一孔【kǒng】作为空白调零孔【kǒng】，该孔不加【jiā】任【rèn】何试剂，只是zui后【hòu】加底【dǐ】物溶液【yè】及【jí】2N H2SO4，测量时先用此孔调【diào】OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试【shì】验时将【jiāng】反应板放于【yú】铺【pù】有湿布【bù】的密闭盒内，酶标板加上盖【gài】或覆膜。

4. 未【wèi】使用完【wán】的酶标板或者试剂，请于9-22℃保存【cún】，标准【zhǔn】品、生物-素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液【yè】请依据所需的量配置【zhì】使【shǐ】用【yòng】，请勿重【chóng】复使用已稀释过的标准【zhǔn】品、生物-素标记【jì】抗体工作【zuò】液【yè】或、辣【là】根过氧化物酶标记亲【qīn】和素工作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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