大鼠 FII ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 FII ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂【jì】取出放置30分【fèn】钟，平【píng】衡至室温，所有标准品【pǐn】和样【yàng】品必需设置平行对照【zhào】实【shí】验，快速加入试剂至样品【pǐn】中，立【lì】即漩涡震荡2秒【miǎo】混匀。

1. 依据实验键【jiàn】盘纸【zhǐ】决定酶标条【tiáo】的使用量【liàng】，将【jiāng】剩余的酶标条连同干燥剂一起放【fàng】回密封塑料袋，密封【fēng】，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中和液至各【gè】个微孔中【zhōng】，除了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特【tè】异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了【le】TA（全活性【xìng】）孔和【hé】Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液【yè】至各孔中，除了TA（全【quán】活性【xìng】）孔【kǒng】、Blank（空白【bái】）孔和NSB（非特异【yì】结合）孔。

9. 将【jiāng】酶【méi】标孔置【zhì】于孔板振动器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸上拍干【gàn】微孔【kǒng】内溶液，加洗【xǐ】涤液400μL每孔洗3次，每次【cì】需【xū】拍【pāi】干。

11. 后一次【cì】洗【xǐ】涤，清空各微孔，在干净的无尘吸水纸上轻巧酶标板数【shù】次【cì】，以【yǐ】确【què】保没有【yǒu】洗涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于【yú】室温静置5~30分钟【zhōng】。（显色【sè】底物A和B需在临用前15分【fèn】钟内等体【tǐ】积混合，并避光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪【yí】Blank（空白）孔值，读取450nm处【chù】的光【guāng】密度值，在570nm至590nm之间好【hǎo】有修正，如果酶标仪不能【néng】自动清除Blank(空【kōng】白【bái】)孔值，那么【me】手动扣除每个读数的Blank（空白）孔【kǒng】光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂【jì】盒时【shí】，应将各【gè】种【zhǒng】试剂管离心数分钟，以便试【shì】剂集中【zhōng】到管底。

2. 每次实验留一【yī】孔作为空白调零孔，该【gāi】孔【kǒng】不【bú】加任何试剂，只是zui后加底【dǐ】物溶【róng】液及2N H2SO4，测量时【shí】先【xiān】用此孔调OD值至零。

3. 为防止样【yàng】品蒸发，试验时将反应板【bǎn】放于铺有【yǒu】湿布【bù】的密闭盒内，酶标板【bǎn】加上盖或覆膜。

4. 未使【shǐ】用完的酶【méi】标【biāo】板或者试剂，请于9-22℃保【bǎo】存，标准品、生物-素标【biāo】记抗体工作液、辣根过【guò】氧化物酶标【biāo】记亲和【hé】素工【gōng】作【zuò】液请【qǐng】依据所需的量【liàng】配【pèi】置【zhì】使用【yòng】，请勿【wù】重复使用已稀释【shì】过的标准品、生物-素标记抗体【tǐ】工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工【gōng】作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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