大鼠 UP ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 UP ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将【jiāng】各【gè】种试剂【jì】取出放置【zhì】30分钟，平衡至室温，所有标准品和样品必需【xū】设置平行对照【zhào】实验，快速加入试剂至【zhì】样品中【zhōng】，立【lì】即漩涡震荡【dàng】2秒混匀。

1. 依据实验键盘【pán】纸决定酶【méi】标条的使用量，将剩余的酶标条连【lián】同干燥剂一【yī】起放回密封【fēng】塑料【liào】袋，密封【fēng】，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至各【gè】个【gè】微孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结合【hé】）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至【zhì】各【gè】孔中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

8. 移取50μL 抗【kàng】体工作液至【zhì】各孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔置于孔板振动器上，250~500rpm，室温孵育【yù】2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸上【shàng】拍【pāi】干微孔内溶液，加洗涤液400μL每孔【kǒng】洗3次，每次【cì】需拍干【gàn】。

11. 后【hòu】一次洗涤，清空各【gè】微孔【kǒng】，在【zài】干净的无尘吸水纸上【shàng】轻巧酶标板数次，以确保没有洗涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显【xiǎn】色底物溶液，于室【shì】温静置5~30分钟。（显色【sè】底物A和【hé】B需在临用前15分钟内等体积混合，并避光放置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标仪Blank（空白）孔值【zhí】，读取【qǔ】450nm处的光密度值【zhí】，在570nm至【zhì】590nm之间好有修正，如果酶标仪不【bú】能自动【dòng】清除Blank(空白)孔【kǒng】值，那么手【shǒu】动扣除每个读【dú】数的Blank（空白【bái】）孔【kǒng】光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用户在【zài】初次使用试剂盒时，应将各【gè】种试剂【jì】管【guǎn】离心数分钟，以便试剂集中到管【guǎn】底。

2. 每次实【shí】验【yàn】留一孔作为【wéi】空白【bái】调【diào】零【líng】孔，该孔不加任何试剂，只是zui后加底物溶【róng】液及2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值至零。

3. 为防止样品蒸发【fā】，试验时将反应板放于铺有【yǒu】湿【shī】布的密闭盒内，酶标板加上【shàng】盖或覆【fù】膜。

4. 未使【shǐ】用【yòng】完的酶标【biāo】板或者试剂，请【qǐng】于9-22℃保【bǎo】存，标准品、生物-素标记抗体工作液、辣【là】根过【guò】氧化物【wù】酶标记亲和【hé】素【sù】工作【zuò】液请依据所【suǒ】需【xū】的量配置使用，请【qǐng】勿重复使用已稀释【shì】过的标准品、生物-素标记抗体工作液或、辣根过氧【yǎng】化物酶【méi】标记亲和素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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