大鼠 ENK ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 ENK ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种【zhǒng】试剂取【qǔ】出放置30分钟，平衡至【zhì】室温，所有标【biāo】准品和样【yàng】品必需设置平行【háng】对照实验，快速加入试【shì】剂至样【yàng】品中，立即漩【xuán】涡震荡2秒混匀。

1. 依【yī】据实验键盘纸决定酶标条的使【shǐ】用【yòng】量【liàng】，将剩余的酶标条连【lián】同干燥【zào】剂一起放回密封塑【sù】料袋，密封，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中和液至各个微孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和【hé】Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结合)孔【kǒng】和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结【jié】合）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶【ǒu】联酶至【zhì】各孔中【zhōng】，除【chú】了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗体工作【zuò】液至各孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结【jié】合）孔。

9. 将【jiāng】酶标孔置于孔板振【zhèn】动【dòng】器上，250~500rpm，室【shì】温孵育2小时。

10. 在吸水纸上【shàng】拍干微【wēi】孔内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每孔洗【xǐ】3次【cì】，每【měi】次需拍干。

11. 后一【yī】次洗涤，清空各微孔【kǒng】，在【zài】干净的无尘吸水纸上轻巧酶【méi】标板【bǎn】数次，以确保没有洗【xǐ】涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色【sè】底【dǐ】物【wù】溶液，于室温【wēn】静置【zhì】5~30分【fèn】钟。（显色底物A和B需在临用前15分钟内【nèi】等体积混【hún】合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标仪Blank（空白）孔【kǒng】值，读取450nm处【chù】的光密度值，在570nm至590nm之【zhī】间好有修正【zhèng】，如果酶【méi】标仪不能自动清除Blank(空白【bái】)孔值【zhí】，那么手动【dòng】扣除每个读数【shù】的【de】Blank（空白）孔光密【mì】度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试【shì】剂【jì】管离【lí】心数分钟【zhōng】，以便试【shì】剂集中到管【guǎn】底【dǐ】。

2. 每次实验留【liú】一【yī】孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂【jì】，只【zhī】是zui后加底物【wù】溶液及2N H2SO4，测量时先用【yòng】此孔调OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试【shì】验时【shí】将反应板【bǎn】放于铺有湿布的密闭盒内，酶【méi】标板加【jiā】上【shàng】盖【gài】或覆膜。

4. 未使用完的酶【méi】标板或【huò】者【zhě】试剂，请【qǐng】于9-22℃保存，标【biāo】准品、生物-素标记【jì】抗体工作液【yè】、辣根过【guò】氧化物酶标记亲【qīn】和素工作【zuò】液请依【yī】据所需的量配置使用，请勿重【chóng】复使用已稀【xī】释过的标准品【pǐn】、生【shēng】物-素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶【méi】标【biāo】记亲和素工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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