大鼠 Endotoxin 试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 Endotoxin 试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用【yòng】前将各种试【shì】剂取出放【fàng】置30分钟，平【píng】衡至室温，所有标准品和样品必需【xū】设置【zhì】平行对【duì】照实验，快【kuài】速加入试剂至样品中【zhōng】，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实【shí】验键盘纸决定酶标条的使用【yòng】量，将【jiāng】剩余的酶【méi】标条连同干燥剂一起【qǐ】放回密封塑料【liào】袋，密封，4℃保存。

2. 移【yí】取50μL中和【hé】液至各【gè】个微孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔【kǒng】。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结【jié】合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特【tè】异结【jié】合）孔。

7. 移取50μL 偶联【lián】酶至【zhì】各孔中，除【chú】了TA（全【quán】活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作【zuò】液至各孔中，除【chú】了TA（全活性【xìng】）孔、Blank（空【kōng】白）孔和NSB（非特异结【jié】合）孔【kǒng】。

9. 将酶标【biāo】孔置于孔板振动器【qì】上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸上拍【pāi】干微孔内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每【měi】孔洗3次，每次需【xū】拍干。

11. 后【hòu】一【yī】次洗【xǐ】涤，清空各微孔，在【zài】干【gàn】净的无尘吸水纸上【shàng】轻巧酶标板数【shù】次，以确保没有洗涤液残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底【dǐ】物溶液，于室温静置5~30分钟。（显色底物A和B需在【zài】临用前【qián】15分【fèn】钟内等【děng】体积混合，并避光放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值【zhí】，读取450nm处【chù】的光【guāng】密【mì】度值，在570nm至590nm之间好有修正，如果酶标仪【yí】不【bú】能自动清除Blank(空白)孔值，那么手动【dòng】扣除每个读数【shù】的Blank（空【kōng】白）孔光密【mì】度值。

注意事项：

1. 用户在初次【cì】使用试【shì】剂【jì】盒时，应将各【gè】种试【shì】剂管离心数【shù】分钟，以便试剂集中到管底。

2. 每次实验留一孔作为空白调【diào】零【líng】孔，该孔不加【jiā】任何试剂，只是zui后【hòu】加【jiā】底物【wù】溶液及2N H2SO4，测量时先【xiān】用此孔调OD值【zhí】至零。

3. 为防【fáng】止样品蒸发，试验【yàn】时将反应【yīng】板放于铺有湿布的密闭盒内，酶【méi】标【biāo】板【bǎn】加上【shàng】盖或覆膜。

4. 未【wèi】使用【yòng】完的酶【méi】标【biāo】板或者试剂，请于9-22℃保存，标准品、生物-素标【biāo】记抗体工【gōng】作液、辣根过【guò】氧化物酶标【biāo】记亲和素工作液请依据所需【xū】的【de】量配置使【shǐ】用，请勿重复使【shǐ】用已稀释【shì】过的标准品【pǐn】、生物-素标记抗【kàng】体【tǐ】工作液或、辣根过氧化物酶标【biāo】记亲和【hé】素工作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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