大鼠 RYR1 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 RYR1 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种【zhǒng】试【shì】剂取出放置30分钟，平衡至室温，所【suǒ】有标【biāo】准品和样品必【bì】需设【shè】置平行对照实验，快速【sù】加【jiā】入试剂至样品【pǐn】中，立即漩涡【wō】震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘【pán】纸决定酶标【biāo】条的使用量【liàng】，将【jiāng】剩余的酶标条连同干燥【zào】剂一起【qǐ】放回密封塑【sù】料袋，密封，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中【zhōng】和液【yè】至各个微【wēi】孔【kǒng】中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结合)孔【kǒng】和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中【zhōng】，除【chú】了TA（全活性）孔和【hé】Blank（空白【bái】）孔。

8. 移取50μL 抗体【tǐ】工作液至各孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结【jié】合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置于孔板振动器上【shàng】，250~500rpm，室【shì】温【wēn】孵育2小时。

10. 在吸【xī】水纸【zhǐ】上拍干微【wēi】孔内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每【měi】次需【xū】拍干。

11. 后【hòu】一次洗涤，清空各微【wēi】孔，在干净的无尘吸水纸上轻巧酶标板数次，以确【què】保没【méi】有【yǒu】洗涤液残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室温静置5~30分【fèn】钟【zhōng】。（显色底物【wù】A和B需在临【lín】用前【qián】15分钟内等体积混合，并避光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪【yí】Blank（空白）孔值【zhí】，读取450nm处的光【guāng】密度【dù】值，在570nm至590nm之间好有修正，如果【guǒ】酶标仪不能自动【dòng】清除Blank(空白)孔值，那么【me】手动扣除【chú】每个读数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在【zài】初次使用试剂【jì】盒时，应将各种【zhǒng】试剂管离心数分钟，以便【biàn】试剂【jì】集中到管【guǎn】底。

2. 每次实验留一孔作为空白调零【líng】孔，该孔不加任【rèn】何试剂【jì】，只【zhī】是【shì】zui后加底物溶【róng】液【yè】及2N H2SO4，测量时先【xiān】用此孔调【diào】OD值至零。

3. 为【wéi】防【fáng】止样品【pǐn】蒸发，试验【yàn】时将反应【yīng】板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加【jiā】上盖或【huò】覆膜。

4. 未使用完【wán】的【de】酶【méi】标板或【huò】者试剂，请于9-22℃保存，标准品、生物-素标记【jì】抗体工作液、辣根过氧化物【wù】酶标记亲和素【sù】工【gōng】作液请依据所需【xū】的量【liàng】配【pèi】置使【shǐ】用，请勿重【chóng】复使用已稀释过的标准品、生【shēng】物-素标记抗体工作液【yè】或、辣根【gēn】过氧化物酶标记亲【qīn】和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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