大鼠 TⅢ ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 TⅢ ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各【gè】种试【shì】剂取出放置【zhì】30分【fèn】钟，平衡至室【shì】温，所有【yǒu】标准品和【hé】样品【pǐn】必需设【shè】置平行【háng】对照实验，快速加入试剂至样品中【zhōng】，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸【zhǐ】决定酶标条的使用【yòng】量，将【jiāng】剩余的酶标条连【lián】同干【gàn】燥剂一起放回【huí】密封【fēng】塑料袋，密【mì】封，4℃保存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液【yè】至各个微孔中，除【chú】了TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结【jié】合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结【jié】合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶【méi】至各孔中，除了TA（全活【huó】性）孔【kǒng】和Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体工作液【yè】至各孔中，除【chú】了TA（全活性【xìng】）孔、Blank（空【kōng】白）孔和NSB（非特异结【jié】合【hé】）孔。

9. 将酶【méi】标孔置【zhì】于孔板振动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵【fū】育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸上拍干微【wēi】孔内【nèi】溶液，加洗涤液【yè】400μL每孔洗3次，每【měi】次需拍【pāi】干【gàn】。

11. 后一次洗【xǐ】涤【dí】，清【qīng】空各【gè】微孔，在【zài】干净的无尘吸水纸上轻巧酶【méi】标板数次，以【yǐ】确保【bǎo】没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色【sè】底物溶液，于室温【wēn】静【jìng】置5~30分钟。（显【xiǎn】色底【dǐ】物A和B需在临用前15分钟【zhōng】内等体积【jī】混【hún】合【hé】，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标仪Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】值，读取450nm处的光密【mì】度值，在570nm至590nm之间好有修正，如果酶标仪不能自动清除Blank(空【kōng】白【bái】)孔值，那么【me】手动扣除每个【gè】读【dú】数的Blank（空白）孔光密度【dù】值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在【zài】初次使用试剂盒时，应将各种试剂【jì】管离心数【shù】分钟，以便试【shì】剂集中到管底【dǐ】。

2. 每次实【shí】验【yàn】留一孔【kǒng】作为空白调【diào】零孔，该孔不加任何试【shì】剂【jì】，只【zhī】是zui后加底物溶液【yè】及2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值至零。

3. 为【wéi】防止样【yàng】品蒸发，试验【yàn】时将反应板放于铺有湿布的密【mì】闭盒内，酶标板加上盖【gài】或覆【fù】膜。

4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于9-22℃保存【cún】，标【biāo】准品、生物【wù】-素标记抗【kàng】体工作液、辣根过氧化物【wù】酶【méi】标记亲和素工【gōng】作液请【qǐng】依据所需的量配置使【shǐ】用，请勿【wù】重复使用已稀释过的标准品、生物-素标记抗体工作液或、辣根过氧【yǎng】化物酶【méi】标记亲【qīn】和【hé】素工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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