大鼠 T4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 T4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试【shì】剂取出【chū】放置30分钟，平【píng】衡至【zhì】室温，所有【yǒu】标准品和样品必【bì】需设置平行对【duì】照实验，快速加入试剂【jì】至样品中【zhōng】，立即漩涡震【zhèn】荡2秒混匀。

1. 依据实验【yàn】键盘纸【zhǐ】决定【dìng】酶标条的使用量，将剩余的酶标条连同干燥剂【jì】一起放回密封塑【sù】料袋【dài】，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个【gè】微孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔和【hé】Blank（空【kōng】白）孔。

3. 移【yí】取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结合）孔【kǒng】。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶至各孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】。

8. 移【yí】取【qǔ】50μL 抗体工作液至各孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非特异结合【hé】）孔。

9. 将酶标孔置【zhì】于孔板振动器【qì】上【shàng】，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸上拍干微孔内溶液，加【jiā】洗涤液【yè】400μL每孔洗3次，每【měi】次需拍【pāi】干【gàn】。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在干净的无【wú】尘吸【xī】水纸【zhǐ】上轻巧酶【méi】标板数次，以确保没有洗【xǐ】涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔【kǒng】200μL显色【sè】底物溶液，于【yú】室【shì】温静置5~30分钟。（显色【sè】底物A和B需在临用前15分【fèn】钟内等体积【jī】混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白【bái】）孔值【zhí】，读【dú】取450nm处的光密度【dù】值，在570nm至590nm之间好有修【xiū】正，如果酶标【biāo】仪不【bú】能自动清除Blank(空白)孔值，那么手动【dòng】扣【kòu】除每【měi】个读数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次【cì】使用试剂【jì】盒时，应将【jiāng】各种试剂管【guǎn】离心【xīn】数分钟，以【yǐ】便试剂集中【zhōng】到管底。

2. 每【měi】次【cì】实验留一孔作为空白调【diào】零孔，该孔【kǒng】不加【jiā】任何试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量【liàng】时先用此孔调OD值至零。

3. 为防【fáng】止样品蒸【zhēng】发，试【shì】验【yàn】时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上【shàng】盖或【huò】覆膜【mó】。

4. 未使用完的酶标板【bǎn】或者试剂，请【qǐng】于9-20℃保存，标准品、生【shēng】物-素标记抗【kàng】体工作液、辣根过氧化【huà】物酶标记亲和素工作液请【qǐng】依据所【suǒ】需的【de】量配置【zhì】使用，请勿【wù】重复【fù】使用【yòng】已稀【xī】释过的标准品、生物【wù】-素标记抗体工作【zuò】液或、辣根过【guò】氧化物酶标记【jì】亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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