大鼠 AKP ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 AKP ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取出放置【zhì】30分【fèn】钟，平衡至室温，所【suǒ】有标准品和【hé】样品必需【xū】设置平行对照实验，快速加【jiā】入【rù】试剂至样品中，立即漩涡震【zhèn】荡2秒【miǎo】混【hún】匀。

1. 依据实验键盘纸决定酶标条【tiáo】的使用量，将剩余的【de】酶标条连【lián】同干燥剂一起放回密封【fēng】塑料【liào】袋【dài】，密封，4℃保【bǎo】存【cún】。

2. 移取50μL中【zhōng】和【hé】液至【zhì】各【gè】个微孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结【jié】合）孔。

7. 移【yí】取【qǔ】50μL 偶【ǒu】联酶至各孔中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗【kàng】体工【gōng】作液至各孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非特异结合）孔。

9. 将【jiāng】酶标孔置于孔【kǒng】板振【zhèn】动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小时。

10. 在吸【xī】水纸【zhǐ】上拍干微孔内溶【róng】液【yè】，加洗涤液400μL每孔洗3次，每次【cì】需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在【zài】干净的【de】无【wú】尘吸水纸上轻巧【qiǎo】酶标板数次，以确【què】保没有洗涤【dí】液残【cán】留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室温静置【zhì】5~30分钟。（显【xiǎn】色底物【wù】A和B需在临用前【qián】15分钟内等体积混合，并避【bì】光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪【yí】Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密度值，在570nm至590nm之间好【hǎo】有修正，如【rú】果酶标仪不能自动清除Blank(空白)孔值，那么手动扣【kòu】除每个【gè】读【dú】数【shù】的Blank（空【kōng】白）孔光密度值【zhí】。

注意事项：

1. 用户在初【chū】次使用【yòng】试剂盒时【shí】，应将各种试剂【jì】管离心数分钟，以便试【shì】剂【jì】集中到管底。

2. 每次【cì】实验留【liú】一孔【kǒng】作【zuò】为空白调零孔，该孔不加任何【hé】试【shì】剂，只是zui后加底物溶【róng】液及2N H2SO4，测量【liàng】时先【xiān】用此孔调OD值至零。

3. 为【wéi】防【fáng】止样品蒸发，试验时将反应板【bǎn】放【fàng】于铺【pù】有湿布的密【mì】闭盒内，酶标板加上盖或【huò】覆膜。

4. 未使用【yòng】完的【de】酶标板【bǎn】或【huò】者试剂【jì】，请于9-22℃保存，标准【zhǔn】品、生物【wù】-素标【biāo】记抗体【tǐ】工作液、辣根过氧化物酶标【biāo】记【jì】亲【qīn】和素工作液请依据所【suǒ】需的量配置使用，请勿【wù】重复【fù】使用已稀【xī】释过的标准品、生物-素标记抗【kàng】体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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