大鼠 MMP-9 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 MMP-9 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试【shì】剂取【qǔ】出放置【zhì】30分钟，平衡【héng】至【zhì】室温，所有标准品和样【yàng】品【pǐn】必【bì】需设置平行【háng】对照实验，快速加【jiā】入试剂至样品中，立即漩【xuán】涡震荡2秒混【hún】匀。

1. 依据实验键【jiàn】盘纸【zhǐ】决定酶标条的使【shǐ】用量【liàng】，将剩【shèng】余的酶标条连同干燥剂一【yī】起放回密封塑料袋，密封，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中和液至各【gè】个微孔中，除了TA（全【quán】活性）孔和【hé】Blank（空白）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异结合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移【yí】取【qǔ】50μL 偶【ǒu】联【lián】酶至各孔中，除了TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

8. 移【yí】取50μL 抗体工作【zuò】液至各孔中【zhōng】，除了【le】TA（全活性）孔【kǒng】、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置于孔板振【zhèn】动器【qì】上，250~500rpm，室【shì】温孵育2小时。

10. 在吸【xī】水纸上【shàng】拍干微孔内溶液，加【jiā】洗涤液400μL每【měi】孔洗3次，每次需拍【pāi】干。

11. 后【hòu】一次【cì】洗【xǐ】涤【dí】，清空各微孔，在干净的无尘吸水纸上轻【qīng】巧酶标板数【shù】次，以确【què】保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显【xiǎn】色底物溶【róng】液，于室【shì】温【wēn】静置5~30分钟。（显色底物A和B需在临用【yòng】前15分钟【zhōng】内【nèi】等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标仪Blank（空【kōng】白）孔值，读【dú】取450nm处的光密度值，在570nm至590nm之【zhī】间好有修【xiū】正，如【rú】果酶标仪不能自动清除Blank(空白)孔值【zhí】，那么手动【dòng】扣除【chú】每个【gè】读数的Blank（空白【bái】）孔光【guāng】密【mì】度值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次使【shǐ】用试【shì】剂【jì】盒时，应将各种试剂管离心数分钟【zhōng】，以便试剂【jì】集中到管底。

2. 每次实验【yàn】留一孔作为空白【bái】调零孔，该孔不加任何试剂，只是zui后加【jiā】底物溶液【yè】及2N H2SO4，测量时先【xiān】用【yòng】此孔调OD值至【zhì】零。

3. 为防【fáng】止样品蒸【zhēng】发，试验时将反【fǎn】应板放于铺有湿【shī】布的密闭【bì】盒内，酶标板加【jiā】上盖【gài】或覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者试【shì】剂，请于【yú】9-22℃保存，标准品、生物-素【sù】标记【jì】抗体工【gōng】作液、辣【là】根【gēn】过氧化物酶标【biāo】记亲和素工作液请依据所需的【de】量【liàng】配置使用，请【qǐng】勿重复使用【yòng】已稀释【shì】过的标【biāo】准品、生物-素标记【jì】抗体【tǐ】工作液或、辣根【gēn】过氧化物酶【méi】标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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