大鼠 MMP9 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 MMP9 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将【jiāng】各【gè】种试剂取出放置【zhì】30分钟，平衡至室【shì】温【wēn】，所有标准【zhǔn】品【pǐn】和样品必【bì】需设置平行对照实验【yàn】，快速加入【rù】试剂至样品中，立【lì】即漩涡震荡【dàng】2秒混匀。

1. 依据实验键【jiàn】盘【pán】纸决定酶【méi】标条的使用量【liàng】，将剩余【yú】的酶标条连同干燥剂一起放回密封【fēng】塑料袋【dài】，密【mì】封，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中和液至各个【gè】微孔【kǒng】中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和【hé】Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非【fēi】特异结合)孔【kǒng】和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔【kǒng】和【hé】Blank（空白）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗体工【gōng】作液至各孔中，除了【le】TA（全活性【xìng】）孔【kǒng】、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置于孔【kǒng】板振动器上【shàng】，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水【shuǐ】纸上拍干微【wēi】孔内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每孔【kǒng】洗3次，每次【cì】需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各【gè】微孔，在干净的无尘吸水纸上轻巧【qiǎo】酶标板数【shù】次【cì】，以确【què】保没【méi】有洗涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物【wù】溶液，于室温静置5~30分钟。（显色【sè】底物A和【hé】B需在临【lín】用前15分钟【zhōng】内等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标【biāo】仪Blank（空【kōng】白）孔值，读【dú】取450nm处的光密【mì】度值，在570nm至590nm之【zhī】间【jiān】好有修正，如【rú】果酶【méi】标仪【yí】不【bú】能自动清除Blank(空白)孔值，那么手动扣除每个读数的Blank（空白【bái】）孔光密度值【zhí】。

注意事项：

1. 用户在初【chū】次使用【yòng】试【shì】剂盒【hé】时，应将各种试剂【jì】管离心数分钟，以【yǐ】便试剂集中到管底。

2. 每次实验留一孔作为空【kōng】白调零孔【kǒng】，该孔【kǒng】不加任何【hé】试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时先【xiān】用此【cǐ】孔调OD值至零。

3. 为防止【zhǐ】样品蒸发，试验时将反应板放于铺【pù】有湿布的【de】密闭盒【hé】内【nèi】，酶【méi】标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶【méi】标板或者试【shì】剂，请于9-22℃保【bǎo】存，标准品、生物-素标记抗体工【gōng】作液【yè】、辣根过氧【yǎng】化物酶标记亲和素工作液请依据【jù】所需【xū】的量配置使用，请勿重复【fù】使用已稀【xī】释【shì】过的标准品、生物-素标记抗体工作液或、辣根过【guò】氧【yǎng】化物酶标记亲【qīn】和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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