大鼠 ALOX5 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 ALOX5 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将【jiāng】各种试【shì】剂取出【chū】放置30分钟，平衡至室温，所有【yǒu】标准品【pǐn】和样品必【bì】需【xū】设置平行对照实验，快速加入试剂至样品中，立即漩【xuán】涡震荡【dàng】2秒混匀。

1. 依据实验键盘【pán】纸【zhǐ】决定【dìng】酶【méi】标条的使用量，将剩【shèng】余的酶【méi】标条【tiáo】连同干燥剂一【yī】起放回密封塑料袋，密封，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中和【hé】液至各个微孔中，除【chú】了【le】TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异结合【hé】)孔【kǒng】和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取【qǔ】50μL 偶联酶至【zhì】各孔中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体工作液【yè】至各【gè】孔中【zhōng】，除了TA（全活【huó】性）孔、Blank（空白）孔和【hé】NSB（非特【tè】异结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置于【yú】孔板振动器上，250~500rpm，室温孵育【yù】2小时。

10. 在吸水纸上拍干微孔内溶【róng】液，加洗涤【dí】液400μL每孔洗3次，每次【cì】需拍干。

11. 后一次【cì】洗涤，清空各微孔，在干【gàn】净【jìng】的无尘吸水纸【zhǐ】上轻巧酶标板数次，以确【què】保没【méi】有洗【xǐ】涤液残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底【dǐ】物【wù】溶液【yè】，于【yú】室温静置5~30分钟。（显色底【dǐ】物A和B需【xū】在【zài】临用【yòng】前15分【fèn】钟内等体【tǐ】积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶标【biāo】仪Blank（空白）孔值【zhí】，读取450nm处的光密度值，在【zài】570nm至590nm之间好有修正，如果酶标仪不【bú】能【néng】自动清【qīng】除Blank(空白【bái】)孔值，那【nà】么手动【dòng】扣除每个读数的Blank（空白）孔【kǒng】光密【mì】度【dù】值。

注意事项：

1. 用户在初【chū】次使用试【shì】剂盒【hé】时，应将各种试剂管离心【xīn】数分钟，以便【biàn】试剂【jì】集中到管底。

2. 每次【cì】实【shí】验留一孔作【zuò】为空【kōng】白调【diào】零孔，该孔不加【jiā】任【rèn】何【hé】试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔【kǒng】调OD值至零。

3. 为【wéi】防止样品【pǐn】蒸发，试验时将反应板放于铺有【yǒu】湿布的密【mì】闭盒【hé】内，酶标板加上盖【gài】或【huò】覆膜。

4. 未使用完的酶标板【bǎn】或者试【shì】剂【jì】，请于【yú】9-22℃保存【cún】，标准品、生物【wù】-素标记抗体工作液、辣根过氧【yǎng】化物酶标记亲和素工【gōng】作液请依【yī】据所需的量配【pèi】置使【shǐ】用，请勿重复使用已稀释过的标【biāo】准品、生物-素标记抗体工【gōng】作液【yè】或、辣【là】根【gēn】过氧化物酶【méi】标记亲和素工【gōng】作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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