大鼠 CAT ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 CAT ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将各种【zhǒng】试剂取出放置30分钟，平衡至室温，所有标准品和【hé】样品必【bì】需设置平行对照实验【yàn】，快【kuài】速加【jiā】入【rù】试剂至【zhì】样【yàng】品中【zhōng】，立即【jí】漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决定酶【méi】标条的使用【yòng】量【liàng】，将剩余【yú】的酶标条连同干燥剂一【yī】起放回密封塑料袋【dài】，密【mì】封【fēng】，4℃保存。

2. 移取【qǔ】50μL中【zhōng】和液至各个【gè】微孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结【jié】合)孔【kǒng】和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异【yì】结合）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶至【zhì】各孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体工作液至【zhì】各孔中【zhōng】，除【chú】了TA（全活性【xìng】）孔、Blank（空白【bái】）孔和NSB（非特【tè】异【yì】结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置于【yú】孔板振动器上，250~500rpm，室【shì】温孵育【yù】2小时。

10. 在吸水纸上【shàng】拍干微孔内溶液，加洗涤【dí】液400μL每【měi】孔洗3次【cì】，每次需拍【pāi】干。

11. 后一次洗涤，清空各微【wēi】孔，在干净的无尘吸【xī】水【shuǐ】纸【zhǐ】上轻巧【qiǎo】酶标板数次【cì】，以确保没有【yǒu】洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色底物溶【róng】液，于室温静置【zhì】5~30分钟。（显色【sè】底物【wù】A和B需在临【lín】用前15分钟内等【děng】体积混合，并避光【guāng】放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标【biāo】仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密度值，在570nm至590nm之【zhī】间好有【yǒu】修正【zhèng】，如果酶标仪不【bú】能自动【dòng】清除Blank(空【kōng】白【bái】)孔值【zhí】，那么手【shǒu】动扣【kòu】除每个【gè】读数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初【chū】次使用试剂盒时，应将各【gè】种【zhǒng】试剂管离心【xīn】数分钟，以便试剂【jì】集中到【dào】管底。

2. 每次实验留一【yī】孔作为空白调零【líng】孔，该孔不加任何试剂，只是zui后加【jiā】底【dǐ】物溶液及2N H2SO4，测量【liàng】时先用【yòng】此孔【kǒng】调【diào】OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试【shì】验时【shí】将反应板【bǎn】放于铺有【yǒu】湿【shī】布的密闭盒【hé】内，酶标板加上盖或覆【fù】膜。

4. 未使【shǐ】用完的【de】酶标【biāo】板或者试【shì】剂，请于9-22℃保存，标准品【pǐn】、生物【wù】-素标记【jì】抗体工作液、辣根过氧【yǎng】化物酶标记【jì】亲和素工作液请【qǐng】依据所需的量配置【zhì】使【shǐ】用，请勿【wù】重复使用【yòng】已稀【xī】释过的标【biāo】准品、生【shēng】物-素【sù】标记抗【kàng】体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和【hé】素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

大鼠 CAT ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）由上海酶联生【shēng】物【wù】现货供应，包括CAT ELISA试【shì】剂【jì】盒、酶联免疫检【jiǎn】测试【shì】剂盒【hé】说明书、实验原理、操作步骤等产品详【xiáng】细介绍。