大鼠 GPX3 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 GPX3 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用【yòng】前将【jiāng】各【gè】种试剂取出放置【zhì】30分钟，平衡至【zhì】室【shì】温，所【suǒ】有标【biāo】准品和样品必需设置平【píng】行对照实验，快速加入试剂至【zhì】样品【pǐn】中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依【yī】据实【shí】验【yàn】键盘纸【zhǐ】决定酶标条【tiáo】的使用量，将剩余的酶标条连同干燥剂一起放回密封塑【sù】料【liào】袋【dài】，密【mì】封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各【gè】个微【wēi】孔中，除【chú】了TA（全活【huó】性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异【yì】结合【hé】)孔和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体工作液【yè】至各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合【hé】）孔。

9. 将【jiāng】酶标孔置于孔板【bǎn】振动器上，250~500rpm，室温孵【fū】育2小时【shí】。

10. 在吸水纸上拍【pāi】干微孔内【nèi】溶液，加洗涤【dí】液400μL每【měi】孔洗3次，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔【kǒng】，在干净的无【wú】尘吸水纸上【shàng】轻【qīng】巧酶【méi】标板【bǎn】数次，以确保没有洗涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底物【wù】溶液，于【yú】室温静置【zhì】5~30分钟【zhōng】。（显色底物A和B需在临【lín】用前15分【fèn】钟内【nèi】等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标仪Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】值，读取450nm处的光密【mì】度值，在【zài】570nm至590nm之间好有修正，如【rú】果酶标【biāo】仪不能自动清除【chú】Blank(空白)孔值，那么手动扣【kòu】除每个读数【shù】的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在【zài】初次使用试剂盒时【shí】，应将各种试剂管【guǎn】离心【xīn】数分钟，以便【biàn】试剂集【jí】中到管底。

2. 每次实验【yàn】留一【yī】孔作为空白调零孔，该孔不加任何【hé】试剂，只【zhī】是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时先【xiān】用此孔【kǒng】调OD值【zhí】至零。

3. 为【wéi】防止样品蒸发，试【shì】验时将【jiāng】反应板放于铺有湿布的【de】密【mì】闭盒内，酶标板加上盖或【huò】覆【fù】膜。

4. 未使【shǐ】用完【wán】的酶标板或者试剂，请于9-22℃保存，标准【zhǔn】品、生物-素标记抗体工作液【yè】、辣【là】根过氧化物酶标【biāo】记亲【qīn】和素【sù】工作液请依据所需的量配置使用【yòng】，请勿重复使用【yòng】已稀释【shì】过的【de】标准品【pǐn】、生物-素【sù】标记抗【kàng】体工作【zuò】液【yè】或、辣根【gēn】过氧化物酶标记亲和素工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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