大鼠 GSHPX ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 GSHPX ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取【qǔ】出放置30分【fèn】钟，平衡至室温，所有标准品和样品【pǐn】必【bì】需设置平行对【duì】照实验，快速【sù】加【jiā】入试剂至样【yàng】品中，立即【jí】漩涡震荡2秒【miǎo】混匀。

1. 依【yī】据【jù】实验键盘纸决定酶标条的使用量，将【jiāng】剩余的酶标条连同干燥剂一起放回密【mì】封塑【sù】料袋，密【mì】封，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中和【hé】液至各【gè】个微孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结【jié】合【hé】）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶至【zhì】各孔【kǒng】中，除了TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体【tǐ】工作液至各孔中，除了TA（全活【huó】性）孔、Blank（空白【bái】）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔置于孔板【bǎn】振动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小时。

10. 在吸【xī】水纸上拍干微孔【kǒng】内溶【róng】液，加洗涤液400μL每孔洗【xǐ】3次，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在干净【jìng】的无尘吸【xī】水纸上轻【qīng】巧酶标板数【shù】次，以确保没【méi】有【yǒu】洗【xǐ】涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色【sè】底物溶液，于室温【wēn】静置5~30分钟。（显色底物A和B需在临用【yòng】前15分钟【zhōng】内等体【tǐ】积混【hún】合，并避【bì】光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的【de】光【guāng】密度值【zhí】，在570nm至【zhì】590nm之间好有修正，如果酶【méi】标【biāo】仪不能自动清【qīng】除Blank(空【kōng】白)孔值，那么手【shǒu】动扣【kòu】除每个读数的Blank（空白）孔光密度值【zhí】。

注意事项：

1. 用【yòng】户在【zài】初次使用试剂盒时，应将各种试【shì】剂管【guǎn】离心数分【fèn】钟，以便试剂集中【zhōng】到管底。

2. 每次实验留一孔作为空白调【diào】零孔，该孔不【bú】加【jiā】任何试剂，只是zui后【hòu】加【jiā】底物溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值至零。

3. 为防【fáng】止样品【pǐn】蒸【zhēng】发，试验时将反应板放于铺有湿布的密【mì】闭盒内，酶标【biāo】板加上【shàng】盖或覆膜。

4. 未使用完的酶【méi】标板或【huò】者试剂，请【qǐng】于9-23℃保存，标准品【pǐn】、生物-素标记抗【kàng】体工【gōng】作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所【suǒ】需的量配置使用，请勿【wù】重复使用已稀释过【guò】的【de】标准品【pǐn】、生物【wù】-素标记抗体工作液或、辣【là】根【gēn】过氧化【huà】物酶【méi】标记【jì】亲和素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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