大鼠 AST ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 AST ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将【jiāng】各【gè】种【zhǒng】试剂【jì】取出放置【zhì】30分钟，平衡至室温，所有标准品和样品必需设置【zhì】平行对照【zhào】实验【yàn】，快速加入试剂【jì】至样品中，立即【jí】漩涡震荡【dàng】2秒混匀。

1. 依据实验键【jiàn】盘【pán】纸决【jué】定酶标【biāo】条的使用量，将【jiāng】剩余的酶标条【tiáo】连【lián】同干燥剂一起放【fàng】回密封塑料袋，密封，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中和液至各个微孔【kǒng】中，除了【le】TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异【yì】结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中【zhōng】，除了TA（全活【huó】性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工【gōng】作【zuò】液至各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非【fēi】特异结合）孔。

9. 将【jiāng】酶标【biāo】孔置于孔板振【zhèn】动【dòng】器上，250~500rpm，室温孵【fū】育2小时。

10. 在吸【xī】水纸上拍干微孔内溶液，加洗涤液【yè】400μL每孔洗【xǐ】3次，每【měi】次需拍【pāi】干【gàn】。

11. 后【hòu】一次洗涤，清空各微孔，在干净【jìng】的无尘吸【xī】水【shuǐ】纸上轻巧酶标板数【shù】次，以确保没【méi】有洗涤【dí】液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色底物溶液，于室【shì】温静【jìng】置5~30分钟。（显色底物A和B需在【zài】临用前15分钟内等体【tǐ】积【jī】混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标仪【yí】Blank（空白【bái】）孔值【zhí】，读取450nm处的光密度值，在570nm至590nm之间好有修正，如【rú】果酶标仪不能自动清除Blank(空白【bái】)孔值，那么手动【dòng】扣除每个【gè】读数【shù】的Blank（空白）孔光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用户【hù】在初次使用【yòng】试剂盒时，应【yīng】将各种试【shì】剂管离心数【shù】分钟，以便试剂集中到管【guǎn】底。

2. 每次实验留一孔作【zuò】为空【kōng】白【bái】调零孔，该孔不加任何试剂，只是【shì】zui后加底物【wù】溶【róng】液及【jí】2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值至零。

3. 为【wéi】防【fáng】止样【yàng】品蒸发，试验时【shí】将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未【wèi】使用【yòng】完的酶标板或【huò】者试剂，请于9-23℃保存【cún】，标准品、生物【wù】-素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲【qīn】和素工【gōng】作液【yè】请依据所【suǒ】需的量配【pèi】置使用【yòng】，请勿重复使用【yòng】已稀【xī】释过的标准品、生物-素【sù】标记抗【kàng】体工【gōng】作液或、辣根过【guò】氧化物【wù】酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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