大鼠 HDL ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 HDL ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将【jiāng】各种试【shì】剂取出【chū】放置30分钟，平衡【héng】至【zhì】室温，所有标准品和【hé】样品必需设置平【píng】行对照实【shí】验，快速加【jiā】入试剂至样品中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决定酶标条的【de】使用量，将【jiāng】剩余的【de】酶【méi】标条连【lián】同干【gàn】燥剂【jì】一【yī】起【qǐ】放回密封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移【yí】取50μL中和液至各个【gè】微【wēi】孔中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔【kǒng】。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特异【yì】结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔【kǒng】中，除了TA（全【quán】活性【xìng】）孔和Blank（空白【bái】）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔中，除了【le】TA（全【quán】活性【xìng】）孔【kǒng】、Blank（空白）孔和NSB（非特异结【jié】合）孔。

9. 将【jiāng】酶【méi】标孔【kǒng】置于孔板振动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小时。

10. 在吸水纸上拍干微孔【kǒng】内溶液【yè】，加【jiā】洗涤【dí】液400μL每孔洗3次，每次【cì】需拍干。

11. 后【hòu】一次洗涤，清空各【gè】微孔，在干净的【de】无【wú】尘吸水纸上轻巧酶标板数【shù】次，以确保没【méi】有洗涤液残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底物溶液【yè】，于室温静置5~30分【fèn】钟。（显【xiǎn】色底物A和B需【xū】在临【lín】用前【qián】15分钟内等体【tǐ】积混合，并避光放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标【biāo】仪Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】值，读【dú】取450nm处的光密度值，在【zài】570nm至590nm之间好有修正，如果酶标仪不能【néng】自动清除【chú】Blank(空白)孔值，那么【me】手动【dòng】扣除每个读数【shù】的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在【zài】初次使【shǐ】用【yòng】试剂盒时，应将各【gè】种试剂管离心数【shù】分钟，以便试剂集中到管底。

2. 每次实验留一孔作【zuò】为空白调零孔【kǒng】，该孔不【bú】加任【rèn】何试剂，只【zhī】是zui后加【jiā】底物溶液及2N H2SO4，测量【liàng】时先用此【cǐ】孔调OD值至零。

3. 为防止样品【pǐn】蒸【zhēng】发，试【shì】验时将反应板【bǎn】放于铺有湿布的密闭盒内，酶【méi】标板【bǎn】加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶【méi】标板或【huò】者试剂【jì】，请于9-23℃保存，标【biāo】准品【pǐn】、生物-素标记抗体工作液、辣根过氧【yǎng】化物酶标记亲和素工【gōng】作液请依据所需的量配【pèi】置使用，请勿重复使用已稀释过的【de】标准【zhǔn】品、生【shēng】物-素【sù】标【biāo】记抗体【tǐ】工作液或、辣根【gēn】过【guò】氧化【huà】物酶标记亲【qīn】和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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