大鼠IFN-γ ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠IFN-γ ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用【yòng】前将各种试剂【jì】取出【chū】放置【zhì】30分钟，平衡【héng】至室【shì】温，所有标准品和样品必需设置平行对【duì】照【zhào】实验，快速【sù】加入试剂至样【yàng】品中，立即漩涡【wō】震荡2秒混【hún】匀。

1. 依【yī】据实【shí】验键盘纸决定【dìng】酶【méi】标【biāo】条的使用量，将剩余的酶标条连同干燥剂一起放回密封塑【sù】料袋【dài】，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液【yè】至【zhì】各个微孔【kǒng】中，除【chú】了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非【fēi】特异【yì】结合)孔【kǒng】和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合【hé】）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至【zhì】各孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白【bái】）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗体工作液【yè】至各孔中，除了【le】TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和【hé】NSB（非特异结合【hé】）孔。

9. 将酶标孔置于孔板振【zhèn】动器上【shàng】，250~500rpm，室【shì】温【wēn】孵育2小时【shí】。

10. 在【zài】吸水纸【zhǐ】上拍干微孔【kǒng】内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每孔洗【xǐ】3次，每次需拍干。

11. 后【hòu】一次洗涤，清空各微孔，在干净的【de】无【wú】尘吸水【shuǐ】纸上轻巧酶【méi】标板数次，以确【què】保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶【róng】液，于室温【wēn】静置【zhì】5~30分【fèn】钟。（显色底物A和B需【xū】在临用前15分【fèn】钟内等体积混合，并避光放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空【kōng】白【bái】）孔【kǒng】值，读取450nm处的【de】光【guāng】密度值，在570nm至590nm之间好有【yǒu】修正，如果【guǒ】酶【méi】标仪不能自动清除【chú】Blank(空【kōng】白)孔值，那么手【shǒu】动扣除每【měi】个读数的Blank（空白）孔【kǒng】光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用户在【zài】初次使用【yòng】试【shì】剂盒时，应将各种试剂管离心【xīn】数分钟，以便【biàn】试剂集中【zhōng】到管底。

2. 每【měi】次实【shí】验留一孔作【zuò】为【wéi】空白调零孔【kǒng】，该孔不加任何试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时先【xiān】用【yòng】此孔【kǒng】调OD值至零。

3. 为【wéi】防【fáng】止样品蒸发，试【shì】验【yàn】时将反应板放于铺有湿布的密【mì】闭盒内，酶【méi】标板加上盖或覆膜。

4. 未使用【yòng】完的酶标板或【huò】者试剂，请于9-23℃保存，标准品、生物-素标记抗体工作液、辣根过氧化物【wù】酶标记亲和素工作液【yè】请依据【jù】所【suǒ】需【xū】的【de】量配置使用，请勿重复使【shǐ】用已【yǐ】稀【xī】释过的标准品、生物-素标记抗体工作液或、辣【là】根过【guò】氧化【huà】物酶【méi】标【biāo】记亲和素工作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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