大鼠 ADP ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 ADP ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用【yòng】前【qián】将各【gè】种【zhǒng】试剂【jì】取出放置30分钟，平衡至室【shì】温，所有标准品和样【yàng】品必需设置【zhì】平行对照实验，快【kuài】速加入【rù】试剂至样品中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决【jué】定酶标条的使用量，将剩余【yú】的酶标【biāo】条连【lián】同干燥【zào】剂一起【qǐ】放回密封塑【sù】料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个微【wēi】孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非【fēi】特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了【le】TA（全【quán】活性【xìng】）孔【kǒng】和Blank（空白【bái】）孔。

8. 移取50μL 抗【kàng】体工作液至各孔【kǒng】中【zhōng】，除了TA（全活【huó】性【xìng】）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特【tè】异结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔【kǒng】置于孔板振【zhèn】动器【qì】上，250~500rpm，室【shì】温孵育2小时。

10. 在吸水【shuǐ】纸上拍干微孔内溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次【cì】，每次需【xū】拍干【gàn】。

11. 后【hòu】一次洗涤，清空【kōng】各微孔，在干净【jìng】的无尘吸水纸上轻巧酶标板数次【cì】，以确保没有洗涤液残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物【wù】溶【róng】液【yè】，于室温静置5~30分钟。（显色底物A和【hé】B需在临用前【qián】15分钟内等体积混合，并【bìng】避光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空【kōng】白）孔值，读取450nm处的光密【mì】度值，在570nm至590nm之间好【hǎo】有修正，如果酶标仪不能【néng】自动清除【chú】Blank(空【kōng】白)孔【kǒng】值，那【nà】么【me】手动【dòng】扣除【chú】每个读数的Blank（空白）孔光密【mì】度值。

注意事项：

1. 用户【hù】在初次使用试剂【jì】盒时【shí】，应【yīng】将各种试【shì】剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。

2. 每次实【shí】验留一孔作为空白调零【líng】孔，该孔不加任【rèn】何试剂，只是zui后加【jiā】底【dǐ】物溶液及2N H2SO4，测量【liàng】时先用此孔【kǒng】调OD值至零。

3. 为防止样品蒸【zhēng】发，试验时【shí】将反【fǎn】应【yīng】板放于铺有湿布【bù】的密闭盒内，酶标板【bǎn】加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者试剂【jì】，请于9-23℃保存，标准品、生物【wù】-素标【biāo】记抗【kàng】体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作【zuò】液请【qǐng】依据所需的量配置使用，请勿重【chóng】复使用已稀释过的标准【zhǔn】品【pǐn】、生物【wù】-素【sù】标记抗体工作液或、辣根过【guò】氧【yǎng】化【huà】物酶标【biāo】记亲和素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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