大鼠 BAX ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 BAX ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将【jiāng】各种试剂取出放置【zhì】30分【fèn】钟，平衡【héng】至室温，所有标准品和样品必需设【shè】置平行对【duì】照实验，快速加入试【shì】剂至样品【pǐn】中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依【yī】据实验【yàn】键盘纸决定【dìng】酶标条的【de】使用量【liàng】，将剩余的酶标条连同【tóng】干燥剂一起放【fàng】回密封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至【zhì】各【gè】个微【wēi】孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结合）孔。

7. 移取【qǔ】50μL 偶【ǒu】联酶至各【gè】孔中，除【chú】了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工【gōng】作液至各孔中，除了【le】TA（全活性）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和【hé】NSB（非【fēi】特异结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置于孔板振动器上【shàng】，250~500rpm，室【shì】温孵育2小时。

10. 在吸水纸【zhǐ】上【shàng】拍干微孔内溶【róng】液，加洗涤液400μL每孔洗3次【cì】，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各【gè】微孔，在【zài】干净的无尘吸水纸上轻【qīng】巧【qiǎo】酶标板数次，以确保没【méi】有【yǒu】洗涤液残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底【dǐ】物溶液【yè】，于【yú】室温静置【zhì】5~30分钟。（显色底物A和B需在临用前15分钟内等体积混【hún】合，并避光【guāng】放【fàng】置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除【chú】酶标仪Blank（空【kōng】白）孔值，读取450nm处的光密度【dù】值，在570nm至【zhì】590nm之间好有【yǒu】修正，如果酶标仪不能【néng】自动清除【chú】Blank(空白)孔【kǒng】值，那【nà】么手动【dòng】扣除每个读【dú】数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户【hù】在【zài】初次使用试剂盒【hé】时【shí】，应【yīng】将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。

2. 每次【cì】实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只【zhī】是zui后【hòu】加底【dǐ】物【wù】溶液及【jí】2N H2SO4，测量时先【xiān】用此孔调OD值至【zhì】零。

3. 为【wéi】防止样品蒸发，试验时将反应板【bǎn】放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板【bǎn】加【jiā】上盖或覆膜。

4. 未使用完【wán】的【de】酶标板或者【zhě】试剂【jì】，请【qǐng】于9-23℃保存，标准品、生物-素标【biāo】记抗【kàng】体工作液、辣根过【guò】氧化物酶标记亲和【hé】素工作液请【qǐng】依据所需的量配置使用，请勿重复使用已稀释过的标准品、生物【wù】-素标记抗体工作液【yè】或【huò】、辣根过氧化物酶标记【jì】亲和【hé】素【sù】工【gōng】作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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