大鼠 PKC ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 PKC ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用【yòng】前将各种试剂取出【chū】放置30分钟，平衡至【zhì】室温【wēn】，所有标准【zhǔn】品【pǐn】和样品必需设置平行对照实验【yàn】，快速加入试【shì】剂至样品中【zhōng】，立即【jí】漩涡震【zhèn】荡2秒混匀。

1. 依据【jù】实验键盘纸决定酶标条的使【shǐ】用量，将【jiāng】剩余的酶标【biāo】条连同干燥剂一起放回【huí】密【mì】封塑料袋，密【mì】封，4℃保存。

2. 移【yí】取50μL中和液至【zhì】各【gè】个【gè】微孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特【tè】异结合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各【gè】孔中【zhōng】，除了TA（全活性【xìng】）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体【tǐ】工作液至各孔中【zhōng】，除了【le】TA（全活【huó】性）孔、Blank（空【kōng】白【bái】）孔和NSB（非特异结【jié】合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置于孔【kǒng】板振动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育【yù】2小时。

10. 在吸水纸【zhǐ】上拍干微孔内【nèi】溶【róng】液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每次【cì】需拍干。

11. 后【hòu】一【yī】次洗涤，清空【kōng】各微孔，在干净的无尘吸水纸上轻【qīng】巧酶标【biāo】板数次，以【yǐ】确保没【méi】有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底【dǐ】物溶液【yè】，于室温静置5~30分钟。（显色【sè】底物A和【hé】B需在临用前15分钟内等体积混合，并【bìng】避【bì】光放置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光【guāng】密度【dù】值，在570nm至【zhì】590nm之间好有修【xiū】正，如果酶标【biāo】仪不能自动清除Blank(空【kōng】白)孔值【zhí】，那么【me】手动扣除每个读数的【de】Blank（空白）孔光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用户在初次【cì】使用试剂【jì】盒【hé】时，应将各种试【shì】剂管离心数分钟，以【yǐ】便【biàn】试【shì】剂集中到管底。

2. 每次实验【yàn】留【liú】一孔作【zuò】为【wéi】空白【bái】调零孔，该孔不加任何试【shì】剂【jì】，只是zui后加底【dǐ】物溶液及2N H2SO4，测量【liàng】时先用此孔调OD值至零。

3. 为防止【zhǐ】样品蒸发，试验时【shí】将反【fǎn】应板放于铺有湿布【bù】的密闭【bì】盒内，酶标板【bǎn】加上【shàng】盖或覆膜。

4. 未使用【yòng】完的酶标板或【huò】者试剂，请【qǐng】于9-20℃保【bǎo】存，标准品、生【shēng】物-素标【biāo】记抗【kàng】体工作液、辣根【gēn】过氧化物酶标记亲和素工作液【yè】请依据所需的量【liàng】配置使用【yòng】，请勿【wù】重复使用已稀【xī】释过【guò】的标准品、生物-素【sù】标记抗【kàng】体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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